[发明专利]一种混合微生物种衣剂及其制备方法

权利要求书

1.一种混合微生物种衣剂，其特征是，由以下重量份数的原料组成：

水产品蛋白氨基酸溶液 65～70份

助剂 1～3份

混合活菌共生液 5～10份

成膜剂 8.5～13.5份

保护剂 0.1～0.3份

七水硫酸锌 0.2～1份

黄腐酸 1～2份，

所述混合活菌共生液包括海洋细菌XS1412C、球形芽孢杆菌、固氮菌和共生液，所述共生液组分为：蛋白胨1～5份、酵母粉1～3份、氯化钠1～3份、海藻酸钠0.5～3份，磷酸二氢钾0.05～0.1份，硫酸镁0.01～0.30份；海洋细菌XS1412C浓度含量为2.0×10⁶～6.0×10⁹cfu/mL，球形芽孢杆菌孢子含量为3.0×10⁷～6.0×10⁹cfu/mL，固氮菌细菌浓度含量为3.0×10⁶～5.0×10⁹cfu/mL。

2.根据权利要求1所述的混合微生物种衣剂，其特征在于，由以下重量份数的原料组成：

水产品蛋白氨基酸溶液 67.5份

助剂 2份

混合活菌共生液 8份

成膜剂 11.5份

保护剂 0.2份

七水硫酸锌 0.8份

黄腐酸 1.5份。

3.根据权利要求1或2所述的混合微生物种衣剂，其特征在于：所述助剂为褐藻寡糖溶液。

4.根据权利要求1或2所述的混合微生物种衣剂，其特征在于：所述保护剂为腈菌唑、三唑醇或烯唑醇中的一种。

5.一种如权利要求1-4所述的混合微生物种衣剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）制备水产品蛋白氨基酸溶液：将水产品加工下脚料制备成匀浆，先加入木瓜蛋白酶进行初次搅拌酶解，然后调节pH至2.5～4.5，加入胃蛋白酶进行二次搅拌酶解，得到水产品蛋白氨基酸溶液；

（2）制备成膜剂：将蟹源壳聚糖用醋酸-醋酸钠溶解后，调节pH值至3.5～5.5，加入壳聚糖酶水解，酶解结束后,沸水浴灭酶活，冷却至室温,将溶液pH值调至中性，离心收集上清液，制得成膜剂；

（3）制备混合活菌共生液：先将海洋细菌XS1412C和球形芽孢杆菌于共生液中初次培养，然后接种固氮菌，继续培养，得到混合活菌共生液；

（4）制备助剂：先将海藻酸钠用磷酸溶液溶解，再加入褐藻胶裂解酶水解，沸水浴灭活，冷却，得到褐藻寡糖溶液；

（5）制备种衣剂：取步骤（3）制备的混合活菌共生液与步骤（1）制备的水产品蛋白氨基酸溶液充分混合，再加成膜剂、保护剂、褐藻寡糖溶液、黄腐酸、七水硫酸锌，搅拌均匀，得到混合微生物种衣剂。

6.根据权利要求5所述的混合微生物种衣剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，初次搅拌酶解的时间为3～5h，搅拌速度为80～100r/min，酶解温度为35～45℃；二次搅拌酶解的时间为5～10h，搅拌速度为60～80r/min，酶解温度为30～40℃。

7.根据权利要求5所述的混合微生物种衣剂的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，醋酸-醋酸钠浓度为0.03～0.12mol/L，酶底比为7～14%，酶解温度为35～45℃，酶解时间为2～3h，沸水浴时间为10～15min，离心速率为5000～8000r/min，离心时间为10～15min。

8.根据权利要求5所述的混合微生物种衣剂的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，培养温度为26～33℃，初次培养时间为24～36h，继续培养时间为12～24h。

9.根据权利要求5所述的混合微生物种衣剂的制备方法，其特征在于：步骤（4）中，磷酸的浓度为10～60mmol/L，水解温度为35～43℃，海藻酸钠溶液浓度为4～6%(W/V)，褐藻胶裂解酶添加量为0.1%～0.3%，水解时间为2～5h，沸水浴时间为8～12min。