[发明专利]一种尿液免疫球蛋白G检测试剂盒及制备方法

说明书

本发明涉及医学检测技术领域，具体涉及一种尿液免疫球蛋白G检测试剂盒及制备方法，包括试剂R1、试剂R2和校准品，试剂R1为PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸‑磷酸盐缓冲液和2‑吗啉乙磺酸缓冲液中的一种或几种，试剂R2包括免疫球蛋白G抗体致敏聚苯乙烯胶乳颗粒，免疫球蛋白G抗体包括羊抗人免疫球蛋白G多抗、羊抗人免疫球蛋白G多抗FC端、兔抗人免疫球蛋白G多抗和兔抗人免疫球蛋白G多抗γ链中的一种或两种，致敏聚苯乙烯胶乳颗粒粒径为60nm、70nm、77nm、80nm、85nm到90nm中的一种或两种，解决了试剂盒的线性范围较窄、检测灵敏度低的问题。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，尤其涉及一种尿液免疫球蛋白G检测试剂盒及制备方法。

背景技术

免疫球蛋白是有抗体活性的动物蛋白，主要存在于血浆中，也见于其他体液、组织和一些分泌液中。正常尿液中含有极微量的蛋白质，由正常肾小球毛细血管壁滤出，绝大部分被肾小管重吸收。当肾小球发生疾病时，由于肾小球滤膜通透性增高或破损断裂，尿中可有免疫球蛋白，种类也不同。临床通过检测尿免疫球蛋白，作为多类疾病的诊断指标。

目前，现有技术(CN113156136A)公开了一种检测尿液中免疫球蛋白G的试剂盒。该方法为普通免疫比浊法检测试剂盒，检测的线性范围较窄，线性范围为0.2g/L～80g/L，而正常人群中尿液样本人免疫球蛋白G的含量通常低于10mg/L，使得现有的检测尿液中免疫球蛋白G的试剂盒的灵敏度达不到临床应用的要求。

发明内容

本发明的目的在于提供一种尿液免疫球蛋白G检测试剂盒及制备方法，旨在解决检测尿液中免疫球蛋白G的试剂盒的线性范围较窄、检测灵敏度低的问题。

为实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种尿液免疫球蛋白G检测试剂盒，包括试剂R1、试剂R2和校准品；

所述试剂R1为缓冲液；所述试剂R2是用免疫球蛋白G抗体致敏聚苯乙烯胶乳颗粒，置于所述缓冲液中；所述校准品为人免疫球蛋白G，用所述缓冲液稀释成不同浓度；

所述缓冲液为PBS缓冲液、甘氨酸缓冲液、柠檬酸-磷酸盐缓冲液和2-吗啉乙磺酸缓冲液中的一种或几种；

所述免疫球蛋白G抗体包括羊抗人免疫球蛋白G多抗、羊抗人免疫球蛋白G多抗FC端、兔抗人免疫球蛋白G多抗和兔抗人免疫球蛋白G多抗γ链中的一种或两种；

所述聚苯乙烯胶乳颗粒粒径为60nm、70nm、77nm、80nm、85nm到90nm中的一种或两种。

其中，所述校准品包括人免疫球蛋白G、缓冲液和防腐剂。

其中，所述免疫球蛋白G抗体与聚苯乙烯胶乳颗粒的重量比为1～30:100，所述聚苯乙烯胶乳颗粒的粒径在60nm到90nm之间。

其中，所述免疫球蛋白G抗体致敏聚苯乙烯胶乳颗粒的制备方法包括以下步骤：

在所述聚苯乙烯胶乳颗粒中滴加1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺中和N-羟基琥珀酰亚胺或N-羟基硫代琥珀酰亚胺，得到活化的聚苯乙烯胶乳颗粒；

将所述免疫球蛋白G抗体与所述活化后的聚苯乙烯胶乳颗粒混合反应，得到免疫球蛋白G抗体致敏聚苯乙烯胶乳颗粒；

其中，所述活化反应缓冲液的PH范围为6.0-6.5。

第二方面，本发明提供了一种尿液免疫球蛋白G检测试剂盒制备方法，包括以下步骤：

将所述免疫球蛋白G抗体与所述活化后的聚苯乙烯胶乳颗粒混合反应，得到免疫球蛋白G抗体致敏聚苯乙烯胶乳微球；

使用乙醇胺对所述聚苯乙烯胶乳微球上未反应的基团进行两次封闭后进行一次离心，得到试剂R2浓缩液；