[发明专利]特异性结合蓖麻毒素的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了特异性结合蓖麻毒素的抗体或其活性片段、包括所述抗体的胶体金免疫层析检测试纸或试剂盒及其应用。本发明的检测试纸或试剂盒生产方便，效果稳定，无非特异反应，包被量低，有利于大批量生产。本发明的方法操作简便快捷、重现性好、极其方便现场使用，该方法的建立不仅丰富了现有的蓖麻毒素检测方法，同时也为蓖麻毒素中毒的治疗以及紧急预防奠定基础。

技术领域

本发明涉及免疫领域，具体涉及特异性结合蓖麻毒素的抗体以及检测蓖麻毒素的检测试纸及试剂盒。

背景技术

蓖麻毒素（Ricin Toxin，RT）来源于大戟科植物蓖麻（Ricinus communis）的种子，是一种致命的、毒性极强的生物毒素，可引起意外中毒，也可用于犯罪企图。一分子RT进入细胞内，就足以使整个细胞蛋白质合成停止而死亡，其毒性是氰化物的6000倍。蓖麻种子的毒性在19世纪末在斯特拉斯堡的Schmiedeberg实验室开始进行研究，随后在多尔帕特医学院（现在的塔尔图），从蓖麻籽或滤饼中纯化出一种剧毒的蛋白质，并命名为RT。RT分子量约为60 kDa，是一种II型核糖体灭活蛋白（RIP），由A链（RTA）和B链（RTB）通过二硫键连接而成。提取高纯度的RT，是验证其生物特性和制备RT单克隆抗体的基础。

因此建立一种快速便捷、灵敏度高及特异性好的检测RT方法显得十分迫切。

发明内容

本发明的第一个目的是提供特异性结合蓖麻毒素的抗体及其活性片段。

具体而言，本发明提供的抗体或活性片段包含至少一个重链可变区和至少一个轻链可变区，其中：

所述重链可变区具有SEQ ID NO: 3所示的CDR1，SEQ ID NO: 4所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 5所示的CDR3；或者，所述重链可变区具有SEQ ID NO: 13所示的CDR1，SEQ IDNO: 14所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 15所示的CDR3；

所述轻链可变区具有SEQ ID NO: 8所示的CDR1，SEQ ID NO: 9所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 10所示的CDR3；或者，所述轻链可变区具有SEQ ID NO: 18所示的CDR1，SEQ IDNO: 19所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 20所示的CDR3。

作为本发明的一种优选方案，所述抗体中，所述重链可变区具有SEQ ID NO: 3所示的CDR1，SEQ ID NO: 4所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 5所示的CDR3；所述轻链可变区具有SEQ ID NO: 8所示的CDR1，SEQ ID NO: 9所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 10所示的CDR3。

作为本发明的一种优选方案，所述抗体中，所述重链可变区具有SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO: 1所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰获得的保守性变异体；所述轻链可变区具有SEQ ID NO: 6所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO: 6所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰获得的保守性变异体。

作为本发明的一种优选方案，所述抗体中，所述重链可变区具有SEQ ID NO: 13所示的CDR1，SEQ ID NO: 14所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 15所示的CDR3；所述轻链可变区具有SEQ ID NO: 18所示的CDR1，SEQ ID NO: 19所示的CDR2和/或SEQ ID NO: 20所示的CDR3。

作为本发明的一种优选方案，所述抗体中，所述重链可变区具有SEQ ID NO: 11所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO: 11所示的氨基酸序列经过一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰获得的保守性变异体；所述轻链可变区具有SEQ ID NO: 16所示的氨基酸序列，或SEQ ID NO: 16所示的氨基酸序列经一个或多个氨基酸添加、删除、替换或修饰获得的保守性变异体。