[发明专利]适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框及其应用在审
| 申请号： | 202210080475.0 | 申请日： | 2022-01-24 |
| 公开（公告）号： | CN114703201A | 公开（公告）日： | 2022-07-05 |
| 发明（设计）人： | 陈守文;金辉;石姣;魏子涵;蔡冬波;罗淦;邱湘琪;楼丽君;李俊辉 | 申请（专利权）人： | 绿康生化股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/31 | 分类号： | C12N15/31;C07K14/195;C12N15/76;C12N1/21;C12R1/54 |
| 代理公司： | 福州鼎新知识产权代理有限公司 35263 | 代理人： | 李向楠;杨慧娟 |
| 地址： | 353400 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 适用于 弗氏链 霉菌 透明 血红蛋白 表达 及其 应用 | ||
1.适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框，其特征在于：所述表达框的核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框，其特征在于，其构建方法为：将透明颤菌血红蛋白基因vgbS与弗氏链霉菌中碳酸酐酶CynT的信号肽SPCynT、链霉菌组成型强启动子P
3.适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于，包括将权利要求1所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框转入表达载体中，得到含有所述适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框的表达载体，并将所述含有所述适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框的表达载体，导入链霉菌中构建转基因菌株。
4.根据权利要求3所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于：将所述转基因菌株按照现有的链霉菌发酵生产工艺进行发酵。
5.根据权利要求4所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于：将所述转基因菌株应用于发酵生产新霉素。
6.根据权利要求5所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于，所述转基因菌株发酵生产新霉素的发酵培养基配方为：10-30 g/L葡萄糖，50-90g/L玉米淀粉，10-30 g/L蛋白胨，3-9g/L酵母粉，20-40 g/L花生粕，3-9 g/L硫酸铵，2-10g/L 氯化钠，0.1-0.5g/L 磷酸氢二钠，1-8g/L 轻质碳酸钙，0.1-0.5g/L淀粉酶，灭菌前调pH至7.2-7.7。
7.根据权利要求3所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于：所述的表达载体为适用于链霉菌的表达载体。
8.根据权利要求7所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于：所述的表达载体为pSET152载体。
9.根据权利要求3所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于：所述的链霉菌为弗氏链霉菌。
10.根据权利要求9所述的适用于弗氏链霉菌的透明颤菌血红蛋白表达框在链霉菌中的应用，其特征在于：所述的弗氏链霉菌为弗氏链霉菌Sf01，所述弗氏链霉菌Sf01于2022年01月21日保藏在位于武汉的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2022111。
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