[发明专利]用于检测肿瘤微小核酸标志物的表面增强拉曼散射检测试剂盒及其制备方法与应用

权利要求书

1.用于非疾病诊断目的的肿瘤微小核酸标志物检测的表面增强拉曼散射检测试剂盒，其特征在于，所述SERS检测试剂盒包含SERS检测芯片、第一试剂和第二试剂；

所述SERS检测芯片为表面修饰有发夹型DNA单链H1的银纳米棒阵列基片；

所述第一试剂为发夹型DNA单链H2，所述第二试剂为配合基片使用的SERS探针；

所述SERS探针为表面修饰探针单链P和拉曼分子5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)的金纳米颗粒。

2.根据权利要求1所述的用于非疾病诊断目的的肿瘤微小核酸标志物检测的表面增强拉曼散射检测试剂盒，其特征在于：

以检测胃癌微小核酸标志物miRNA-378为例，

所述发夹型DNA单链H1碱基序列如SEQ ID NO：2所示：

H1：5’-SH-(CH₂)₆-TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TTT TCC TTC TGA CTC CAAGTC CAG TCA GAA GGA ACT AGC ACT GGA CTT GGA GT-3’

所述发夹型DNA单链H2的碱基序列如SEQ ID NO：3所示：

H2：5’-GTC CAG TGC TAG TTC CTT CTG ACT GGA CTT GGA CAC AGA AGG AAC TAG CCGACT CAA GAG CAC-3’

所述探针单链P的碱基序列如SEQ ID NO：4所示：

P：5’-SH-(CH₂)₆-TTT TTT TTT GTG CTC TTG AGT CG-3’。

3.根据权利要求2所述的用于非疾病诊断目的的肿瘤微小核酸标志物检测的表面增强拉曼散射检测试剂盒，其特征在于：

调整H1、H2和P的碱基序列为H1-199a、H2-199a和P-199a，所得试剂盒用于检测胃癌微小核酸标志物miRNA-199a-3p；

调整H1、H2和P的碱基序列为H1-100、H2-100和P-100，所得试剂盒用于检测胃癌微小核酸标志物miRNA-100。

4.根据权利要求1所述的用于非疾病诊断目的的肿瘤微小核酸标志物检测的表面增强拉曼散射检测试剂盒，其特征在于，所述银纳米棒阵列采用真空电子束蒸发镀膜技术制备；所述金纳米颗粒粒径为15～100nm。

5.权利要求1所述的用于非疾病诊断目的的肿瘤微小核酸标志物检测的表面增强拉曼散射检测试剂盒，其特征在于，所述发夹型DNA单链H1的浓度为0.5～2μM，所述第一试剂的浓度为5～20μM。