[发明专利]一种植物油中黄曲霉毒素B1的拉曼快速检测方法

说明书

本发明公开了一种植物油中黄曲霉毒素B1的拉曼快速检测方法，包括：S1)植物油处理：称取适量植物油待检样品，加入一定量提取液和净化填料，涡旋或超声振荡后离心，取上清液待用；S2)液液萃取：在上清液中加入有机试剂，进行液液萃取，静置分层后取有机相层备用；S3)富集：取有机相层液体1‑3mL于瓶中进行氮气吹干，加入复溶液复溶；S4)拉曼检测：取上述富集后的液体与纳米金属粒子、辅助增强试剂混合均匀后进行检测。本发明通过简单前处理结合金属纳米粒子的表面增强拉曼散射效应，满足黄曲霉毒素B1在植物油中简单、快速、廉价、高灵敏度等方面的检测需求。

技术领域

本发明涉及一种植物油检测方法，尤其涉及一种植物油中黄曲霉毒素B1的拉曼快速检测方法。

背景技术

我国是植物油生产和消费大国，食用油是居民日常消费必需品之一，为人体提供必需的脂肪酸及亚油酸等人体所需营养物质，在人们饮食体系中占有重要位置。植物油种类非常丰富，常见的食用植物油主要有大豆油、玉米油、菜籽油、花生油、油茶籽油、芝麻油等。近年来居民对油品质量愈发关注，国家对居民食用油质量安全问题也高度重视，其中由于食用植物油的原料和加工属性，极易受到黄曲霉毒素的污染。天然食物中以黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)最为多见，黄曲霉毒素B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物，含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素)。黄曲霉毒素B1是已知的化学物质中致癌性最强的一种，黄曲霉毒素B1对人类具有强烈的毒性，黄曲霉毒素B1的急性毒性是氰化钾的10倍，砒霜的68倍，且黄曲霉毒素耐热性强，280℃才可分解，故一般烹调加工温度下难以破坏，国家质检总局规定黄曲霉毒素B1是大部分食品的必检项目之一。依次提供一种简单、高效、准确、快速的黄曲霉毒素B1检测方法对植物油质量安全监管问题有着重要意义。

目前，常用的检测方法是胶体金法、薄层层析法、酶联免疫法、高效液相色谱法，液质联用等，但这些方法存在各种不足，胶体金法灵敏度较低；薄层层析法对检测的规范和熟练度要求较高，准确度较差；酶联免疫吸附测定法检测时，易出现假阳性误判，需要采用高效液相色谱法或气相色谱-质谱法进行确证；高效液相色谱法方法简单，检测限低，但免疫亲和柱价格昂贵，成本较高，对仪器设备、操作人员的要求较高，耗时较长，在检测过程中往往是作为确认检验方法。

在中国专利文献CN 107462564B中公开了一种基于银超晶体的黄曲霉毒素B1快速免标记检测方法，该方法采用超大孔介孔二氧化硅模板负载银结合多元校正方法建立黄曲霉毒素B1测试模型，但未介绍植物油样本中黄曲霉毒素B1具体分离、提取方法。该方法所用增强基底合成方法复杂、步骤繁琐且该模型建立需要一定计算机专业背景，普通分析测试人员不易通过该方法得到准确的黄曲霉毒素B1信号。

在中国专利文献CN106928397A中和中国专利文献CN106442465A中公布了两种黄曲霉毒素B1拉曼检测方法，这两种方法均存在所用SERS基底合成难度大、样品净化、富集方法表述不清问题，不适合海关口岸现场执法使用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种植物油中黄曲霉毒素B1的拉曼快速检测方法，能够现场采集植物油样本，并通过简单前处理结合金属纳米粒子的表面增强拉曼散射效应，来满足黄曲霉毒素B1在植物油中简单、快速、廉价、高灵敏度等方面的检测需求。

本发明为解决上述技术问题而采用的技术方案是提供一种植物油中黄曲霉毒素B1的拉曼快速检测方法，包括如下步骤：S1)植物油处理：称取适量植物油待检样品，加入一定量提取液和净化填料，涡旋或超声振荡后离心，取上清液待用；S2)液液萃取：在上清液中加入有机试剂，进行液液萃取，静置分层后取有机相层备用；S3)富集：取有机相层液体1-3mL于瓶中进行氮气吹干，加入复溶液复溶；S4)拉曼检测：取上述富集后的液体与纳米金属粒子、辅助增强试剂混合均匀后进行检测。

进一步地，所述步骤S1中提取液为甲醇、乙醇和乙腈中一种。

进一步地，所述步骤S1中提取液的质量百分浓度为70％-90％。