[发明专利]羰基还原酶突变体及其应用

权利要求书

1.一种羰基还原酶突变体，其特征在于，所述羰基还原酶突变体的氨基酸序列是SEQID NO：1所示序列发生突变的氨基酸序列，所述突变的氨基酸位点包括：S65；或者所述羰基还原酶突变体的氨基酸序列具有所述突变的氨基酸位点，且与SEQ ID NO：1所示序列具有90％以上同源性、具有羰基还原酶催化活性的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的羰基还原酶突变体，其特征在于，所述S65突变为S65A、S65G或S65D。

3.根据权利要求1所述的羰基还原酶突变体，其特征在于，所述突变为如下突变位点组合之一：S65A+I78V、S65G+I78Q、S65D+I78V、S65A+A201Q、S65A+I78V+M154I、S65A+I78V+A201D、S65A+I78V+A201Q、S65A+P153S+V198I、S65A+I78V+M154I+A201Q、S65A+I78V+P153S+V198I、S65A+I78V+M154I+A202L、S65A+I78V+D182A+A201Q、S65A+I78V+D194A+V198I、S65A+P153S+V198I+A202L、S65A+I78V+M154I+A201Q+A202L、S65A+I78V+P153S+V198I+A201D、S65A+I78V+S145E+P153S+D194A、S65A+I78V+M154I+A155D+A201D、S65A+I78V+M154I+V198I+A201Q+A202L、S65A+I78V+M154I+V198I+A201D+A202L、S65A+I78V+M154I+A155D+V198I+A201D+A202L、S65A+I78V+M154I+A155D+V198I+A201Q+A202L或S65A+I78V+G94T+M154I+A155D+V198I+A201Q+A202L。

4.一种DNA分子，其特征在于，所述DNA分子编码权利要求1至3中任一项所述的羰基还原酶突变体。

5.一种重组质粒，其特征在于，所述重组质粒连接有权利要求4所述的DNA分子。

6.根据权利要求5所述的重组质粒，其特征在于，所述重组质粒为pET-21b(+)、pET-22b(+)、pET-3a(+)、pET-3d(+)、pET-11a(+)、pET-12a(+)、pET-14b、pET-15b(+)、pET-16b(+)、pET-17b(+)、pET-19b(+)、pET-20b(+)、pET-21a(+)、pET-23a(+)、pET-23b(+)、pET-24a(+)、pET-25b(+)、pET-26b(+)、pET-27b(+)、pET-28a(+)、pET-29a(+)、pET-30a(+)、pET-31b(+)、pET-32a(+)、pET-35b(+)、pET-38b(+)、pET-39b(+)、pET-40b(+)、pET-41a(+)、pET-41b(+)、pET-42a(+)、pET-43a(+)、pET-43b(+)、pET-44a(+)、pET-49b(+)、pQE2、pQE9、pQE30、pQE31、pQE32、pQE40、pQE70、pQE80、pRSET-A、pRSET-B、pRSET-C、pGEX-5X-1、pGEX-6p-1、pBV220、pBV221、pBV222、pTrc99A、pTwin1、pEZZ18、pKK232-8、pPIC9k、pGAPZαA、pUC-18或pUC-19。

7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求5或6所述的重组质粒。

8.根据权利要求7所述的宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞为原核细胞或真核细胞。

9.根据权利要求8所述的宿主细胞，其特征在于，所述原核细胞为大肠杆菌DH5α、Top10、BL21-DE3或大肠杆菌Rosetta-DE3细胞；所述真核细胞为酵母细胞。