[发明专利]一株具有提高石斛幼苗萌蘖能力的胶膜菌菌株TP-8及其应用

说明书

本发明提供了一株具有提高铁皮石斛幼苗萌蘖能力的胶膜菌菌株TP‑8及其应用，属于微生物技术领域。本发明提供了一株具有提高铁皮石斛幼苗萌蘖能力的胶膜菌(Tulasnella sp.)菌株TP‑8，保藏编号为CCTCC NO：M 20211283。真菌提高铁皮石斛萌蘖的能力各不相同，接种TP‑8菌株处理的幼苗，其萌蘖数增加显著。同时，TP‑8菌株与铁皮石斛幼苗共生，能一定程度促进幼苗新叶、新根以及促进幼苗节茎变粗壮。铁皮石斛幼苗与本发明菌株TP‑8表现出有益的共生关系，利用TP‑8菌株和铁皮石斛幼苗共生，实现铁皮石斛幼苗菌根化，可作为铁皮石斛栽培的生物菌剂原料。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一株具有提高铁皮石斛幼苗萌蘖能力的胶膜菌菌株TP-8及其应用。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)又被称为铁皮枫斗、黑节草，是我国的特有种，野生资源主要分布于我国湖南、云南、贵州、四川等喀斯特地形，喜温暖湿润气候，适宜在凉爽、湿润、空气畅通的半阴半阳的环境。作为传统中药材的珍品，其化学成分多糖、生物碱、苷类、酚类和木质素等，具有调节免疫功能、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、抗菌等多种药理作用。然而，自然条件下，其繁殖力弱，生长周期长，加上过度采集，同时生境破坏严重，导致铁皮石斛的野生资源极度濒危。因此，如何以现有知识、资源、技术，保护恢复铁皮石斛种群，同时实现恢复友好栽培，满足消费需求成为难点。

虽已获得大量促进种子萌发的共生真菌，且萌发率高，但生长瓶颈在萌发到幼苗阶段之间，种子萌发后无法实现幼苗建成。即使能形成幼苗，但矮小，分化能力弱，不能形成新芽，无萌蘖能力。

然而，现有技术报道了从铁皮石斛成年植株根分离获得的真菌菌株，有些菌株能够对石斛种子和原球茎致死，有些菌株则能够促进铁皮石斛生长，主要体现在提高幼苗鲜重增长、叶绿素含量、促进营养元素的吸收以及提高幼苗中植物生长激素的水平(菌根真菌对铁皮石斛萌发及生长的影响,吴慧凤,海南大学学位论文.2011.5.30)。现有技术研究表明，铁皮石斛在各生长阶段所需的真菌种类不一样，通过测定铁皮石斛原球茎和组培苗的生理指标发现，内生真菌主要通过产生内源激素来调节铁皮石斛的生长发育的。与具有提高萌蘖能力的真菌共生的幼苗能够突破生长瓶颈，快速生长，植株壮大，在自然环境中有较强的适应能力，大大提高存活率。有效真菌的获得目前多采用从兰科植物野生成年植株的根或者原球茎分离，但由于成年植株中存在着大量作用未知的内生真菌，这使得提高幼苗萌蘖能力的有效真菌的筛选和分离变得复杂而繁琐，而野生原球茎又极难获取。因此，获得提高幼苗萌蘖的有效共生真菌是开展铁皮石斛保护、恢复种群资源以及实现恢复友好栽培的关键环节。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一株具有提高铁皮石斛幼苗萌蘖能力的胶膜菌菌株TP-8及其应用。

本发明提供了一株具有提高铁皮石斛幼苗萌蘖能力的胶膜菌(Tulasnellasp.)菌株TP-8，保藏编号为CCTCCNO:M20211283。

优选的，所述胶膜菌菌株TP-8的ITS序列如SEQ ID NO:1所示。

本发明提供了一种提高石斛幼苗萌蘖能力的菌肥，包括所述胶膜菌菌株TP-8和可接受的营养成分。

本发明提供了所述胶膜菌菌株TP-8或所述菌肥在提高石斛幼苗萌蘖能力中的应用。

本发明提供了一种提高石斛幼苗萌蘖能力的方法，将石斛幼苗移栽至共生培养基上生长，将所述胶膜菌菌株TP-8或所述菌肥接种至共生培养基上，使胶膜菌真菌定殖于石斛幼苗根部，培养。

优选的，所述共生培养基包括燕麦琼脂培养基；

所述燕麦琼脂培养基包括4g·L^-1燕麦和10g·L^-1琼脂，培养基pH为5.6～5.8。