[发明专利]一种鸡肠膜蛋白酶解产物的制备方法及应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种枯草芽孢杆菌蛋白酶与胰蛋白酶联合酶解鸡肠膜蛋白产物制备方法及其应用，通过利用复合蛋白酶降解鸡肠膜蛋白生成含小肽的复合产物，小肽含量提高6‑12倍，将酶解产物制备成饲料添加剂添饲到蛋种鸡饲料中，可以提高蛋种鸡产蛋率、受精率、孵化率。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种鸡肠膜蛋白的酶解产物制备方法及应用。

背景技术

近年来，随着人们生活水平的不断提高，人们对于生活质量的要求也在持续上升。鸡肉因其肉质鲜美而深受人们喜爱，成为国内消费者购买的主要肉类食品之一。同时随着我国家禽养殖产业的快速发展，蛋种鸡养殖的规模和数量也获得了较大的提高，从而保障了鸡肉类产品的有效市场供给。但是蛋种鸡的生长发育由于受到诸多因素的影响而产蛋率较低，因此需要通过提高蛋种鸡的繁殖性能来进一步满足市场需求。蛋种鸡在生长发育过程中对于能量和优质蛋白质的需求量较大，良好的饲料营养物质供给才能保证其生长和繁殖性能。一般通过在饲料中添加微生物添加剂及激素类添加剂的方法来提高蛋种鸡的繁殖性能，但是这种方法取得的效果仍然可以进一步提升。通过研发更加新型高效的饲料添加剂，可以进一步提高饲料利用水平，从而不仅进一步提升了蛋种鸡的繁殖性能，还能保障饲料的有效供给，提高养殖场的经济效益。枯草芽孢杆菌蛋白酶有其独特的生化特性，利用该蛋白酶与胰蛋白酶联合降解鸡肠膜蛋白产物作为饲料添加剂促进蛋种鸡产蛋率、受精率、孵化率等技术与方法尚未见报道。为了进一步获得高效价的促进蛋种鸡繁殖性能添加剂，项目组经过长时间的研究和试验获得了本技术。

发明内容

本发明的目的在于解决如何利用微生物酶联合胰蛋白酶降解鸡肠膜蛋白得到的酶解产物来促进鸡生长与繁殖性能的技术，提供了一种鸡肠膜蛋白复合酶解产物的制备方法及其应用。

为了实现上述目的，本发明公开了一种鸡肠膜蛋白复合酶解产物在促进鸡生长与繁殖中的应用。

所述应用是将复合酶解产物添加到鸡饲料中。

所述应用是通过枯草芽孢杆菌蛋白酶与胰蛋白酶联合降解鸡肠膜蛋白生成小肽，制备成饲料添加剂。

所述饲料添加剂的制备过程如下：向复合酶解液中加入3～5倍重量的砻糠粉，自然风干2～7天，粉碎装袋，得到饲料添加剂。

本发明还公开了上述枯草芽孢杆菌蛋白酶和胰蛋白酶复合酶解产物的制备方法，包括以下步骤：

S1：将屠宰后分离得到的鸡肠段用液氮冷冻、压碎、充分破碎肠壁细胞，释放出细胞内容物；

S2：向步骤S1中得到的压碎肠段混合物中加入枯草芽孢杆菌发酵液与胰蛋白酶溶液的混合酶液，所述混合酶液中枯草芽孢杆菌蛋白酶和胰蛋白酶的酶活力比例为1：1，混合后在37℃下酶解2～4h，得到鸡肠膜蛋白的复合酶解产物。

所述枯草芽孢杆菌发酵液的制备步骤如下：

S21：将枯草芽孢杆菌接种于发酵培养基中，于30～53℃下发酵培养36～72h，发酵培养基的起始pH为7.0；

S22：将步骤S21中得到的发酵液在4℃、4000rpm条件下离心20min，取上清液，即得枯草芽孢杆菌发酵液。

所述的胰蛋白酶酶液，是通过市售的胰蛋白酶加入适量的水得到的。

所述步骤S21中的发酵培养基是由碳源、氮源和金属离子配制而成的水溶液，所述碳源和氮源总质量与水的比例为1.5g：50mL，所述碳源、氮源的质量比为2：3，所述金属离子加入量与水的比例为1g：100mL。

所述碳源为葡萄糖、蔗糖、淀粉的组合物，质量比为3：3：3.8，所述氮源为黄豆粉、玉米粉、蛋白胨、牛肉膏的组合物，质量比3：0.5：1.25：0.75，所述金属离子为Ca²⁺、Mg²⁺、K⁺、Cu²⁺，摩尔比为2：1：1：1。