[发明专利]一种脑脱细胞基质的制备方法

权利要求书

1.一种脑脱细胞基质的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

i)提取小鼠的脑作为脱细胞基质的原材料；

ii)采用物理法、化学法和生物法对小鼠的脑进行脱细胞处理得到脑脱细胞基质。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述物理法为对材料进行冻融、加压和/或机械搅拌；

所述化学法为采用酸碱、非离子型除垢剂和/或离子型除垢剂处理材料；

所述生物法为使用核酸酶、脂肪酶、螯合剂和/或毒素处理材料。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括对步骤ii)所得的脑脱细胞基质进行冷冻干燥。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤i)包括以下步骤：提取小鼠的脑后去除小脑并延冠状面切成两半，用PBS溶液清洗后作为原材料。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤ii)中脱细胞处理包括以下步骤：

a)用液氮反复冻融原材料2-5次；

b)在20-30℃下用dH₂O清洗5-15h；

c)用2-6w/v％的脱氧胆酸钠溶液处理10-20h，用PBS溶液清洗20-60min；

d)在35-38℃下用30-50kU/ml的DNA酶Ⅰ溶液处理0.5-2.5h，在20-30℃下用PBS溶液清洗20-60min，再用dH₂O清洗3-5h；

e)在20-30℃下用2-5v/v％的Triton-X100溶液处理1-5h，再用PBS溶液清洗20-60min；

f)在35-38℃下用30-50kU/ml的DNA酶Ⅰ溶液处理0.5-2.5h，在20-30℃下用PBS溶液清洗20-60min。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤a)中冻融是指在液氮中冷冻5-15min，融化升温至室温，用PBS溶液清洗5-30min。

7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤b)-f)进行两到四次。

8.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述dH₂O、SDC溶液、PBS、DNA酶Ⅰ溶液、Triton-X100溶液中包含0.5-2.5v/v％的青霉素-链霉素溶液。

9.一种脑脱细胞基质，采用权利要求1-8任一项所述的制备方法获得。

10.如权利要求9所述的脑脱细胞基质的用途，其特征在于，用于制备治疗创伤性脑损伤的基质材料或用于制备组织工程支架。