[发明专利]一种MOF-808@CREKA@HDBB纳米肿瘤靶向载体的制备方法

说明书

本发明公开了一种MOF‑808@CREKA@HDBB纳米肿瘤靶向载体的制备方法，通过聚集诱导发光有机小分子HDBB的制备和MOF‑808的制备，进一步实现MOF‑801@CREKA@HDBB纳米药物缓释载体的制备，将金属有机框架材料MOF‑808作为基底，通过合成后修饰的方法将具有聚集诱导发光特性的有机小分子4,4＇‑(1E，1E)‑酰胺‑1,2‑二亚二(甲基亚基))二(2‑羟基苯甲酸)(HDBB)和肿瘤靶向功能的细胞穿膜肽Cys‑Arg‑Glu‑Lys‑Ala(CREKA)修饰到MOF‑808材料的表面，利用MOF材料具有高孔隙率的特点，负载抗肿瘤药物，实现肿瘤精准靶向输送和缓释效果，是解决肿瘤治疗的一种新途径，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于纳米药物载体技术领域，尤其涉及一种MOF-808@CREKA@HDBB纳米肿瘤靶向载体的制备方法。

背景技术

已报道的方法(An Aggregation-Induced Emission Based pH-sensitiveFluorescent Probe for Intracellular Acidity Sensing,RSC ADVANCES.2016,6(30):25416-25419.)，其产率和载药量均不高，传统的放化疗抗肿瘤药物缺乏特异靶向性，在体内代谢较快，因药物突释导致剧烈的血药浓度变化，往往对正常组织细胞产生很大的毒性与副作用，给患者的身体和精神带来双重负担，因此，制备一种具有精确靶向功能的纳米药物缓释载体可以避免此类问题的出现。

发明内容

为了解决上述问题，本发明公开了一种MOF-808@CREKA@HDBB纳米肿瘤靶向载体的制备方法，通过金属有机骨架材料的高孔隙率、低细胞毒性特点，实现抗肿瘤药物的高效负载和肿瘤靶向精准转运。

本发明采用以下技术方案：

一种MOF-808@CREKA@HDBB纳米肿瘤靶向载体的制备方法，所述方法包括以下步骤：

S1.1、称取10～20mg HDBB[4,4‘-((1E，1E‘)-酰胺-1,2-二亚二(甲基亚基))二(2-羟基苯甲酸)]，加入细胞穿膜肽CREKA并置于装有20～30ml丙酮的圆底烧瓶中，80～120r/min搅拌至完全溶解后加入MOF-808，密封避光于室温条件下搅拌36～72h；

S1.2、反应完成后用丙酮20～30ml充分洗涤3次，再转移到冷冻干燥机中于-50℃条件下真空干燥12～18h得到MOF-808@CREKA@HDBB纳米肿瘤靶向载体。

进一步地，S1.1所述HDBB的制备方法包括以下步骤：

S2.1、间羟基苯甲酸1.2～2.0g加入8～15ml甲烷磺酸在90～150r/min条件下进行搅拌，缓慢升温至45～60℃，称取1.8～2.4g六次甲基四胺(乌洛托品)，分为5等份后分5次加入，90～150r/min搅拌均匀，升温至70～90℃，回流搅拌3～5h，至反应液中六次甲基四胺消耗完毕；

S2.2、待S2.1所述反应液的温度降低至50℃，加入10～20ml纯化水，停止加热，继续搅拌待溶液温度降至20～25℃，继续搅拌反应液1h后停止；

S2.3、使用乙酸乙酯和甲醇混合溶液(4:1,v/v)5～10ml萃取S1.2处理后的反应液4～6次，合并上层有机相，将有机相用饱和氯化钠溶液2～4ml洗涤3次，再加入0.3～0.8g无水Na₂SO₄钠干燥所得有机相，有机相过滤后用氢氧化钠溶液5～10ml萃取3～5次，所得水相用稀盐酸调pH 3～4，将水相过滤得到析出物，析出物在20～25℃下真空干燥，得浅黄色固体粉末4-醛基-3-羟基苯甲酸1.15～1.50g；