[发明专利]表达G-肌聚糖的腺相关病毒载体的全身递送和肌营养不良症的治疗

权利要求书

1.一种治疗有需要的受试者的肌营养不良症的方法，其包括向所述受试者施用重组腺相关病毒(rAAV)scAAVrh74.MHCK7.hSGCG的步骤，其中

所述rAAV使用全身施用途径并且以基于作为定量标准的线性化质粒为约2x 10¹²vg/kg至约5.0x 10¹⁴vg/kg的剂量来施用；其中与施用所述rAAV之前的血清肌酸激酶(CK)水平相比，在施用所述rAAV之后，所述受试者的所述血清CK水平降低。

2.一种恢复有需要的受试者中的肌营养不良蛋白相关蛋白复合物的方法，其包括施用重组腺相关病毒(rAAV)scAAVrh74.MHCK7.hSGCG的步骤，所述rAAV使用全身施用途径并且以基于作为定量标准的线性化质粒为约2x 10¹²vg/kg至约5.0x 10¹⁴vg/kg的剂量来施用。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中与施用所述rAAV之前的γ-肌聚糖基因表达水平相比，在施用所述rAAV之后，所述受试者的细胞中的所述γ-肌聚糖基因表达水平增加；

其中所治疗受试者的肌肉细胞中的平均rAAV拷贝数为每个细胞核至少0.01个拷贝；

其中与施用所述rAAV之前的水平相比，所述经治疗受试者的肌肉中的中央核百分比和/或纤维化减少；

其中与施用所述rAAV之前的所述受试者的运动功能相比，所述受试者的所述运动功能得到改善；

其中与施用所述rAAV之前的所述受试者的NSAD相比，所述受试者的所述NSAD增加；和/或

其中与施用所述rAAV之前的所述受试者的ALT和AST水平相比，所述受试者的所述ALT和AST水平降低。

4.如权利要求3所述的方法，其中所述运动功能改善至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、45％或50％。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述rAAV使用静脉内途径施用。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述rAAV基于作为定量标准的线性化质粒以4.63x 10¹²vg/kg、约1.85x 10¹³vg/kg或7.41x 10¹³vg/kg，或基于作为定量标准的超螺旋质粒以约1.25x 10¹³vg/kg、约5.0x10¹³vg/kg或约2.0x 10¹⁴vg/kg施用。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中rAAV以约10mL/kg的浓度施用。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述rAAV通过注射、输注或移植来施用。

9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述rAAV通过输注经大约1至2小时施用。

10.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述rAAV经由外周肢体静脉通过静脉内途径施用。

11.如权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述rAAV包含SEQ ID NO:1的人γ-肌聚糖核苷酸序列。

12.如权利要求1-11中任一项所述的方法，其中所述rAAV包含SEQ ID NO:2的MHCK7启动子序列。

13.如权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述rAAV是血清型AAVrh.74的。

14.如权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述rAAV包含与SEQ ID NO:1或SEQ IDNO:7具有至少90％、95％或99％同一性的核苷酸序列。