[发明专利]一种生物传感器及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种生物传感器，其包括同时表达血红素氧化酶-1、藻胆体核蛋白亚基ApcF2和血红素跨膜转运蛋白的工程化细胞。

2.根据权利要求1所述的生物传感器，其中，所述工程化细胞缺失血红素合成酶基因。

3.根据权利要求2所述的生物传感器，其中，所述血红素合成酶基因包括hemF。

4.根据权利要求1-3任一项所述的生物传感器，其中，所述藻胆体核蛋白亚基ApcF2包括BDFP1.1、BDFP1.2、BDFP1.3、BDFP1.4、BDFP1.5、BDFP1.6、BDFP1.7、BDFP1.8或BDFP1.9中的任意一种或至少两种的融合蛋白。

5.根据权利要求1-4任一项所述的生物传感器，其中，所述血红素跨膜转运蛋白包括跨膜转运蛋白ChuA。

6.根据权利要求1-5任一项所述的生物传感器，其中，所述工程化细胞包括工程化大肠杆菌。

7.根据权利要求1-6任一项所述的生物传感器，其中，所述工程化细胞中含有血红素氧化酶-1的编码基因、藻胆体核蛋白亚基ApcF2的编码基因和血红素跨膜转运蛋白的编码基因；

任选地，所述血红素氧化酶-1包括SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列；

任选地，所述血红素跨膜转运蛋白的编码基因包括SEQ ID NO:12所示的核酸序列。

8.根据权利要求1-7任一项所述的生物传感器，其中，所述生物传感器包括工程化大肠杆菌，所述工程化大肠杆菌中含有血红素氧化酶-1的编码基因、藻胆体核蛋白亚基ApcF2BDFP1.6的编码基因和跨膜转运蛋白ChuA的编码基因，并缺失血红素合成酶基因hemF。

9.一种如权利要求1-8任一项所述的生物传感器的制备方法，其包括：

敲除宿主细胞的血红素合成酶基因，并将血红素氧化酶-1的编码基因、藻胆体核蛋白亚基ApcF2的编码基因和血红素跨膜转运蛋白的编码基因导入宿主细胞，得到所述生物传感器。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，所述宿主细胞包括大肠杆菌。

11.根据权利要求9或10所述的方法，其中，所述导入的方法包括电转导、病毒载体系统、非病毒载体系统或直接基因注射中的任意一种。

12.一种组合物，其包括权利要求1-8任一项所述的生物传感器；

任选地，所述组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂、电子回路或稀释剂中的任意一种或至少两种的组合。

13.权利要求1-8任一项所述的生物传感器或权利要求12所述的组合物在检测血红素和/或血液中的应用。