[发明专利]新型冠状病毒抗原和总抗体联合检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒抗原和总抗体联合检测试剂盒，其特征在于，由R1磁珠、R2吖啶、R3吖啶和R4样本处理液组成，使得在一个试剂盒中分别测定新冠病毒抗原及抗体两个靶标；

所述R1磁珠由抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体及新冠病毒刺突蛋白S1亚基重组蛋白包被的顺磁微粒以及磁珠稀释液组成；

所述R2吖啶为吖啶标记的新冠病毒RBD蛋白；

所述R3吖啶为吖啶标记的抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体；

所述R4样本处理液的组成成分为80mM Trizma base、50mM Trizma hydrochloride、15mM尿素、10mM EDTA、0.15％Tween-20和0.15％ProCl in-300，所述R4样本处理液的pH为4.5；

其中，所述抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQID NO:1和SEQ ID NO:2所示；

所述新冠病毒刺突蛋白S1亚基重组蛋白的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ IDNO:3和SEQ ID NO:4所示；

所述新冠病毒RBD蛋白的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示，

所述联合检测试剂盒的靶标组合选自以下：抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体表位74-105aa与抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体表位Gly44-Glu174，S1蛋白表位Val 16-Arg685和RBD蛋白表位319-541aa；

所述抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体表位74-105aa的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示；

所述抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体表位Gly44-Glu174的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示；

所述S1蛋白表位Val 16-Arg685的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示；

所述RBD蛋白表位319-541aa的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ ID NO:13和SEQID NO:14所示。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒抗原和总抗体联合检测试剂盒，其特征在于，所述抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体来源于小鼠腹水提取或杂交瘤细胞体外培养。

3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒抗原和总抗体联合检测试剂盒，其特征在于，抗新冠病毒N蛋白鼠源性单克隆抗体及新冠病毒刺突蛋白S1亚基重组蛋白包被的顺磁微粒和磁珠浓度均为0.2mg/mL，所述吖啶的浓度为5ug/mL-25ug/mL，磁珠稀释液的组成成分为50mM MES、0.15％BSA、0.15％Tween-20和0.5％ProClin-300，pH为7.0，吖啶稀释液的组成成分为30mM PBS、0.15％BSA、0.1％G-Anti-H IgG、0.15％Tween-20和0.5％ProCl in-300，pH为7.0。

4.根据权利要求1所述的新型冠状病毒抗原和总抗体联合检测试剂盒，其特征在于，所述样本为受检者的血清、血浆、鼻咽拭子或胸水。

5.根据权利要求1所述的新型冠状病毒抗原和总抗体联合检测试剂盒，其特征在于，使用所述试剂盒的所述检测方法为直接化学发光一步法，在一个试剂盒中分别测定新冠病毒抗原及抗体两个靶标，并分别报告所述抗原及所述抗体两个检测结果。