[发明专利]测定透明质酸-季铵盐聚合物中季铵盐含量的方法在审
| 申请号： | 202111674548.0 | 申请日： | 2021-12-31 |
| 公开（公告）号： | CN114397399A | 公开（公告）日： | 2022-04-26 |
| 发明（设计）人： | 万丽佳;魏健;康静 | 申请（专利权）人： | 华熙生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/96 | 分类号： | G01N30/96 |
| 代理公司： | 北京唐颂永信知识产权代理有限公司 11755 | 代理人： | 刘伟 |
| 地址： | 250101 山东省济*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 测定 透明 铵盐 聚合物 含量 方法 | ||
1.一种测定透明质酸-季铵盐聚合物中季铵盐含量的方法，其包括：
供试品溶液的制备：将透明质酸-季铵盐聚合物水解得到透明质酸和季铵盐的混合溶液，接着加入盐溶液和乙腈对透明质酸进行沉降，得到的上清液作为供试品溶液；
使用离子色谱法测定供试品溶液中游离季铵盐的含量。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，盐溶液和乙腈的体积比在1：4以上，优选为1:4-1:6；
所述盐溶液为氯化钠溶液、硫酸铵溶液或甲酸铵溶液；
所述透明质酸和季铵盐的混合溶液与所述盐溶液和乙腈总体积的体积比为4:3-9。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述季铵盐为2，3-环氧丙基三甲基氯化铵和/或2,3-二羟基丙基-三甲基氯化铵。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，色谱柱为羧酸官能化阳离子交换色谱柱，优选为CS12A色谱柱。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，流动相为甲磺酸和乙腈，优选的，甲磺酸与乙腈的体积比为60-80:20-40，进一步优选为65-72:28-35；
优选地，甲磺酸的浓度为10-30mmol/L，优选为10-15mmol/L。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，流动相流速为0.5-1.5ml/min，优选为0.5-1ml/min。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的所述方法，其中，进样量为20-100μL；
优选地，柱温为25-40℃，优选为30-35℃。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中，检测器为电导检测器；
优选地，抑制器为阳离子抑制器，所述抑制器流速为流动相流速的1.5-2倍；
优选地，采用外标法计算供试品溶液中游离季铵盐的含量；
优选地，季铵盐的检出限为0.5-2mg/g。
9.一种供试品溶液的制备方法，其包括：
将透明质酸-季铵盐聚合物水解得到透明质酸和季铵盐的混合溶液，接着加入盐溶液和乙腈对透明质酸进行沉降，得到的上清液为供试品溶液。
10.根据权利要求9所述的制备方法，其中，盐溶液和乙腈的体积比在1：4以上，优选为1:4-6；
所述盐溶液为氯化钠溶液、硫酸铵溶液或甲酸铵溶液；
所述透明质酸和季铵盐的混合溶液与所述盐溶液和乙腈总体积的体积比为4:3-9；
优选的，所述季铵盐为2，3-环氧丙基三甲基氯化铵和/或2,3-二羟基丙基-三甲基氯化铵。
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