[发明专利]一种磁珠法快速提取核酸的试剂及核酸提取方法

权利要求书

1.一种用于室温洗脱核酸的纳米磁珠的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：

S1）将100-500质量份的聚乙烯醇、100-200质量份的硅酸钾、200-500质量份的甘油、200-1000质量份的甲醇和500-5000质量份的水混合并分散均匀；

S2）通入氮气，然后加入100-200质量份的氯化亚铁四水合物、200-400质量份的氯化铁六水合物和10-100质量份的聚苯乙烯磺酸钠并混合均匀；

S3）加入50-600质量份的浓氨水溶液，升温至40-70℃，并加热反应2-6小时，并在反应结束后将反应物降至室温；

S4）以1-5质量份/分钟的速度加入100-500质量份的冰乙酸，加入完毕后继续以200-600rpm的速度搅拌反应4-12小时；

S5）在步骤S4）的反应结束之后，依次使用乙醇水溶液和水进行清洗，获得所述纳米磁珠。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：

在步骤S5）中，所述乙醇水溶液为乙醇浓度为75体积%的水溶液，所述水为去离子水，并且先用所述乙醇水溶液洗涤1次，然后用水洗涤1次，如此依次用乙醇水溶液和水重复洗涤3次。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：

所述纳米磁珠为磁珠悬浮液的形式。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：

所述磁珠悬浮液通过在步骤S5）之后将所述纳米磁珠分散至分散液中来制得。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：

所述分散液由20体积%的PEG300和余量的水组成。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于：

所述水为无核酸酶水。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：

所述磁珠悬浮液的pH为5.0。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：

所述磁珠悬浮液中的纳米磁珠的质量体积百分数为10-20%。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：

所述纳米磁珠的粒径范围为0.25-8.5μm。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于：

所述纳米磁珠的粒径范围为0.5-2.5μm。

11.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于：

所述纳米磁珠的磁性物质氧化铁的含量为10-70质量%。

12.根据权利要求11所述的制备方法，其特征在于：

所述纳米颗粒的磁性物质氧化铁的含量为25-50质量%。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的制备方法制得的纳米磁珠。

14.一种磁珠法快速提取核酸的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：

（1）权利要求13所述的纳米磁珠；和/或

（2）用于配制裂解结合液的试剂；

其中，所述裂解结合液包含如下组分或者由如下组分组成：顺丁烯二酸、异硫酸氰胍、碘化钠、EDTA-Na₂、十二烷基苯磺酸钠、Brij 30、聚(乙二醇)-聚(丙二醇)-聚(乙二醇)三嵌段共聚物和水。

15.根据权利要求14所述的试剂盒，其特征在于，所述裂解结合液的pH为4.0-6.5。