[发明专利]一种植物愈伤组织透化液及其应用在审

专利信息
申请号: 202111649879.9 申请日: 2021-12-30
公开(公告)号: CN114277028A 公开(公告)日: 2022-04-05
发明(设计)人: 孙旭武;刘祉辛;于晓乐;刘浩;郭晨曦;周亚萍 申请(专利权)人: 河南大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12Q1/6806;C12N9/42;C12N9/00;C12N9/24;C12N9/18
代理公司: 北京象合知识产权代理事务所(普通合伙) 11893 代理人: 封明艳;郑慧娟
地址: 475004 河南省开封市顺河区明伦*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 一种 植物 组织 透化液 及其 应用
【权利要求书】:

1.一种植物愈伤组织透化液,其特征在于,所述的透化液包括重量份的以下组分:纤维素酶,离析酶,果胶酶,半纤维素酶和蜗牛酶。

2.根据权利要求1所述的一种植物愈伤组织透化液,其特征在于:所述的纤维素酶为纤维素酶R10。

3.根据权利要求1或2所述的一种植物愈伤组织透化液,其特征在于:所述的离析酶为离析酶R10。

4.根据权利要求1所述的一种植物愈伤组织透化液,其特征在于:所述透化液由以下重量份组成:1-5%纤维素酶,0.1-0.8%离析酶,0.5-3%果胶酶,0.5-3%半纤维素酶和0.1-0.5%蜗牛酶。

5.根据权利要求4所述的一种植物愈伤组织透化液,其特征在于:所述透化液由以下重量份组成:2%纤维素酶R10,0.4%离析酶R10,1%果胶酶,1%半纤维素酶和0.4%蜗牛酶。

6.一种利用权利要求1-5任意一项透化液用于植物愈伤组织空间转录组分析的组织切片透化方法,其特征在于,所述的方法包括:

在组织切片中加入透化液,放到PCR仪上透化。

7.根据权利要求6所述方法,所述透化条件为37℃,24min,所述组织切片厚度为10μm。

8.根据权利要求6所述方法,其特征在于:将Visium玻片放在Cassette中,贴着左下角向孔中加入70μl透化液,轻拍Cassette,贴上密封条;

把密封Visium玻片放到Cassette上,然后放到已经预热的37℃的PCR仪上6min后,从PCR仪适配器上拿走Cassette,并移掉密封条;

贴着左下角向C1孔中加入70μl透化液,放到37℃的PCR上,重复步骤,一直添加到最小通透时间对应的孔;

通透时间完成后,从PCR仪适配器上拿走Visium Cassette,移掉密封条,用移液枪移走每孔中的透化液;每个孔中加入100μl 0.1×SSC缓冲液;所述的最小通透时间为3min。

9.权利要求1-5的植物愈伤组织透化液在用于释放植物组织样品中RNA或用于反转录的愈伤组织空间转录组分析中的用途。

10.根据权利要求9所述用途,所述植物为棉花。

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