[发明专利]一种利用种植窝洞骨屑提取人骨髓间充质干细胞的方法在审
申请号: | 202111648037.1 | 申请日: | 2021-12-30 |
公开(公告)号: | CN114317424A | 公开(公告)日: | 2022-04-12 |
发明(设计)人: | 邱憬;朱文卿;汤泽华;陈蔚 | 申请(专利权)人: | 南京医科大学附属口腔医院 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/28;A61P19/08 |
代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 唐循文 |
地址: | 210029 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 种植 窝洞骨屑 提取 骨髓 间充质 干细胞 方法 | ||
1.种植窝洞骨屑在制备人骨髓间充质干细胞中的应用。
2.一种提取人骨髓间充质干细胞的方法,其特征在于,提取对象为种植窝洞骨屑。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤为,无菌收集附于扩孔钻及攻丝钻壁内的种植窝洞骨屑,立即置于4 mL含有2 %双抗、10 % FBS的α-MEM培养液中并封口;将离心管中的碎骨屑连同培养液在超净台内转移至培养皿中,置于37℃、5% CO2及饱和湿度的恒温培养箱内孵育;3天后首次半量更换新鲜培养液,其后每3天全量换液,去除非贴壁细胞;待观察到长梭形细胞以骨屑为中心向周围爬出后更换为1 %双抗、10 % FBS的α-MEM培养液继续培养;当细胞爬至皿底达80 %密度时,加入1 mL 0.25%胰蛋白酶/EDTA消化,1:3传代,记为P1,1:3传代至P3代,得到人骨髓间充质干细胞。
4.权利要求3所述方法制得的人骨髓间充质干细胞。
5.权利要求4所述方法制得的人骨髓间充质干细胞在制备颌骨缺损修复产品中的应用。
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