[发明专利]一种抗肿瘤霉菌酸类化合物及其制备方法、应用

说明书

一种抗肿瘤霉菌酸类化合物及其制备方法、应用，一种抗肿瘤霉菌酸类化合物，结构式如下：该霉菌酸类化合物可用于抗肿瘤药物的制备。

技术领域

本发明属于霉菌酸制备领域，具体涉及一种抗肿瘤霉菌酸类化合物及其制备方法、应用。

背景技术

霉菌酸是α-烷基β-羟基的高级支链脂肪酸。最初是由安得松(R.J.Anderson)等从人结核菌中分离出来的。霉菌酸的化学结构复杂，根据碳数和基团的不同，分为3种类型：①胆碱型霉菌酸：R＝CH₃(CH₂)₁₄，R′＝C₁₄H₂₉；胆碱型霉菌烯酸：R＝CH₃(CH₂)₅CH＝CH(CH₂)₇，R′＝C₁₄H₂₉；②诺卡氏菌中来源的霉菌酸碳数有50个；③分枝杆菌中来源的霉菌酸碳数有80个。

据报道，霉菌酸具有抗肿瘤等生物活性；霉菌酸与细胞壁紧密结合，且极性较小，目前采用的提取纯化方法是先将细胞壁降解，通常采用四丁基氢氧化铵、氢氧化钠、氢氧化钾等碱性物质进行处理，接着采用正己烷、石油醚等低极性有机溶剂萃取，再用正相硅胶层析、薄层层析来制备。但已报道的方法，较难纯化结构类似的霉菌酸。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的缺点，提供一种抗肿瘤霉菌酸类化合物，另一目的是提供一种上述化合物的制备方法及应用。

本发明采用如下技术方案：

一种抗肿瘤霉菌酸类化合物，结构式如下：

一种抗肿瘤霉菌酸类化合物的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，将红色诺卡氏放线菌(Nocardia rubra)活化后进行液体深层发酵，发酵结束后，用离心法将菌丝体与发酵液分离，获得菌丝体；其中，液体深层发酵的培养基配方按重量比为：马铃薯16-25％，葡萄糖1.5-2.5％，余量为水；培养条件为：pH自然，0.1Mpa、121℃灭菌30min，置于25－28℃，180－230r/min恒温摇床中培养10-15天；

步骤二，将步骤一获得的菌丝体，加入四丁基氢氧化铵，50-100℃下水浴4-24h，用等体积的水和二氯甲烷萃取1-3次，二氯甲烷相浓缩，获得有机粗提物；

步骤三，将步骤二获得的有机粗提物，采用反相硅胶柱层析，用甲醇/丙酮：水梯度(0％-100％:100％-0％)洗脱，流速控制5-30mL/min，分部收集，每份浓缩后进行薄层层析分析，用碘和硫酸等显色剂观察，根据Rf值和显色情况合并目标组分，并浓缩得到含有目标成分的组分；

步骤四，将步骤三得到的组分，进行凝胶柱层析，用甲醇、丙酮、氯仿为洗脱剂，控制流速5-30s/滴，分部收集，每份收集3-10ml，进行薄层层析分析，用碘和硫酸等显色剂观察，根据Rf值和显色情况合并目标组分；

步骤五，将步骤四得到的组分，进行正相硅胶柱层析，用石油醚/二氯甲烷/氯仿：丙酮/乙酸乙酯/甲醇比为500-10:10-1为梯度洗脱剂，分部收集，每份收集3-10ml，进行薄层层析分析，用碘和硫酸等显色剂观察，根据Rf值和显色情况合并，得到所述的霉菌酸类化合物。看，

优选的，步骤三中，薄层层析时，展层剂为石油醚/正己烷：丙酮/乙酸乙酯＝10-30:1-5。

优选的，步骤四中，薄层层析时，展层剂为石油醚/正己烷：丙酮/乙酸乙酯＝10-30:1-5。

优选的，步骤五中，薄层层析时，展层剂为石油醚/正己烷：丙酮/乙酸乙酯＝10-30:1-5。

优选的，步骤四中，凝胶柱为Sephadex LH-20凝胶柱。