[发明专利]一种肝脏类器官的培养芯片、肝脏类器官模型及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种肝脏类器官的培养芯片的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

获得具有多个穿孔的薄膜；

将细胞低黏附的材料包被在细胞培养板底部，后将所述薄膜覆盖于所述细胞培养板底部，获得图案化基底；

向所述图案化基底中加入细胞特异性黏附的材料进行包被，获得肝脏类器官的培养芯片。

2.根据权利要求1所述的一种肝脏类器官的培养芯片的制备方法，其特征在于，每个所述穿孔的孔形状包括圆形、椭圆形、半圆形、扇形、三角形、四边形、五边形、六边形和任意多边形中的一种；每个所述穿孔的外接圆直径为100μm～1000μm，所述薄膜的相邻两个所述穿孔的间距为0.5mm～3mm。

3.根据权利要求1所述的一种肝脏类器官的培养芯片的制备方法，其特征在于，所述薄膜的材料包括聚二甲基硅氧烷；所述细胞低黏附的材料包括聚乙二醇；所述细胞特异性黏附的材料包括Matrigel和Collagen中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的一种肝脏类器官的培养芯片的制备方法，其特征在于，所述获得具有多个穿孔的薄膜，包括：

获得具有多个微柱阵列的阳模；

将PDMS倒入所述阳模上，真空干燥并抽真空，并在所述PDMS上覆盖一层PMMA，后用两个玻璃片夹紧固定，烘干；

将凝固的PDMS层取出，并裁剪成适配于细胞培养板形状的PDMS膜，获得具有多个穿孔的薄膜。

5.根据权利要求4所述的一种肝脏类器官的培养芯片的制备方法，其特征在于，所述阳膜的所述微柱阵列高度为30μm～100μm。

6.一种采用权利要求1-5任一项所述的方法制备得到的肝脏类器官的培养芯片。

7.一种肝脏类器官模型的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

于权利要求6所述的肝脏类器官的培养芯片内接种前肠胚细胞，待细胞贴壁后，将所述具有多个穿孔的薄膜移走，吸除所述的肝脏类器官的培养芯片内的培养基，洗涤后加入第一培养基维持培养3～5天；

后依次采用第二培养基维持培养3～5天和第三培养基维持培养≥10天，获得肝脏类器官模型。

8.根据权利要求7所述的一种肝脏类器官模型的制备方法，其特征在于，所述前肠胚细胞的接种密度为1×10⁵～9×10⁵(个/cm²)。

9.一种利用权利要求1～8任意一项所述的方法获得的肝脏类器官模型。

10.一种权利要求9所述的肝脏类器官模型在药理学、药效学、毒理学分析中的应用。