[发明专利]用于宫颈上皮内瘤变检测的组合物、试剂盒及用途

权利要求书

1.试剂在制备通过包括以下步骤的方法用于区分宫颈炎和宫颈上皮内瘤变检测的组合物中的用途，其特征在于，所述试剂包括能够指示生物样品中ACTR3B和DOCK3基因状态的试剂，所述方法包括：

a. 从受试者采集生物样品，并分离DNA，得到长度为1-3Kb的DNA片段；

b. 从所述DNA片段中分离目标序列，进行文库构建，并在末端连接条码接头，采用条码引物进行富集，使所述目标序列或其部分通过位于芯片的纳米孔，其中，所述芯片设置于电极附近，且所述电极能够检测通过所述纳米孔的电流，通过电流变化检测目标序列的信息；

当检测到ACTR3B基因内部或其附近存在HPV基因插入时，将受试者诊断为患有宫颈上皮内瘤变或患宫颈上皮内瘤变风险高；当检测到DOCK3基因内部或其附近存在HPV基因插入时，则将受试者诊断为宫颈炎患者。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述富集包括使长度为1-3Kb的DNA片段与人cot-1DNA混合后蒸干，再复溶于优化后的杂交液中，室温孵育后，在93-97℃温度下保持5-15分钟，加入由多条探针组成的探针组，通过每分钟降低0.1℃缓慢降温到杂交温度，提高捕获目标序列的特异性和长片段结合稳定性，置于63-67℃杂交4-16小时，将产物与链霉亲和素磁珠混合，孵育45min后，用清洗液对磁珠进行清洗，使用随机引物、dNTP、具有单链DNA为引导二链合成活性的酶进行合成和富集。