[发明专利]一株高产3-甲硫基丙醇的内氏假丝酵母及其应用

说明书

本发明属于微生物与发酵工程领域，提供了一株高产3‑甲硫基丙醇的内氏假丝酵母，保藏编号为CGMCC NO.23668。该内氏假丝酵母可用于生产3‑甲硫基丙醇，产量可达3.16 g/L，且乙醇耐受性高，可在酿酒、调味品、食品添加剂行业中进行应用。

技术领域

本发明属于微生物与发酵工程领域，涉及一株内氏假丝酵母，特别涉及一株高产3-甲硫基丙醇的内氏假丝酵母。

背景技术

3-甲硫基丙醇具有强烈的甜香、汤或肉样香气，早在1973年美国食用香料与提取物制造者协会（Flavour and Extract Manufactuere’s Association，FEMA）将其确定为一般认为安全的香料物质，在食品中建议用量为0.1 mg/kg-50 mg/kg，1986年，我国相关食品国家标准也将其列为暂时允许使用的食品香料。尽管3-甲硫基丙醇是否是芝麻香型白酒中的特征风味物质存有争论，但其在部分品牌芝麻香型白酒的风格形成中发挥着重要作用，并且在豉香型白酒及果酒的呈味中也具有重要的贡献，表现出花椰菜和煮熟蔬菜的香气，对风味品质的贡献显著。

3-甲硫基丙醇是一种重要的食品香料，在肉味和鱼味及酱油香味等香精中广泛应用，可以通过化学合成方法和生物转化的方法制备。化学合成方法具有成本低、合成快，产物浓度高的优势，但存在的一些诸如原料毒性高、生产过程中的毒副产物难以去除及污染较大等问题引起关注，在一定程度上限制了其在工业化生产中的长期使用，必须拓展新的生产方法。微生物可以将甲硫氨酸转化为3-甲硫基丙醇。虽然，当前微生物转化合成3-甲硫基丙醇的速率不及化学方法，但由于其具有反应条件温和、产物构型单一、绿色环保、所用原料安全无污染等特点，成为近年来制备“绿色”和“天然”的3-甲硫基丙醇的重要发展方向。

随着技术和时间的发展，人们对天然产品的需求越来越大，对化学合成物质产生抵触心理，虽然化学合成3-甲硫基丙醇方法逐渐成熟，但是微生物代谢生产3-甲硫基丙醇具有广阔前景。

发明内容

针对天然绿色3-甲硫基丙醇不能满足市场需求的问题，本发明提供一种从大曲中分离出来的高产3-甲硫基丙醇的天然菌株YHM-G，乙醇耐受性高、能够利用蛋氨酸生产3-甲硫基丙醇。

本发明的另一目的在于提供利用YHM-G生产3-甲硫基丙醇的方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一株内氏假丝酵母（Candida naeodendra）YHM-G，保藏编号为CGMCC NO. 23668。

上述内氏假丝酵母YHM-G可用于生产3-甲硫基丙醇，如在酿酒、调味品、食品添加剂行业中进行应用。

一种利用内氏假丝酵母YHM-G生产3-甲硫基丙醇的方法，包括以下步骤：

（1）将内氏假丝酵母YHM-G接种于种子培养基中活化，获得种子活化液；

（2）将种子活化液接种于发酵培养基发酵，获得含3-甲硫基丙醇的培养液。

优选地，所述种子培养基中包含：葡萄糖20 g/L，蛋白胨20 g/L，酵母浸粉10 g/L。

优选地，所述活化步骤为：28 ℃、180 r/min下活化24 h。

优选地，所述发酵培养基中包含：葡萄糖10~70 g/L，酵母浸粉0.4~2.8 g/L，L-蛋氨酸2~14 g/L，磷酸二氢钾8 g/L，磷酸氢二钾6 g/L，氯化钠2 g/L，硫酸锌0.03 g/L，氯化镁0.01 g/L，pH 3~7，氯化亚铁0.02 g/L。

更优选地，所述发酵培养基中包含：葡萄糖30~60 g/L，酵母浸粉0.8~1.2 g/L，L-蛋氨酸4~6 g/L，磷酸二氢钾8 g/L，磷酸氢二钾6 g/L，氯化钠2 g/L，硫酸锌0.03 g/L，氯化镁0.01 g/L，氯化亚铁0.02 g/L，pH 4~6。