[发明专利]昆布多糖降解酶OUC-BsLam26及其应用

说明书

本发明公开了一种昆布多糖降解酶OUC‑BsLam26，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码昆布多糖降解酶OUC‑BsLam26的基因，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述昆布多糖降解酶OUC‑BsLam26在降解昆布多糖/制备昆布寡糖中的应用。本发明还公开了一种包含有昆布多糖降解酶OUC‑BsLam26的酶制剂。本发明还公开了携带有编码昆布多糖降解酶OUC‑BsLam26的基因的重组表达载体和重组工程菌。本发明的昆布多糖降解酶OUC‑BsLam26，可作用昆布多糖底物，终产物昆布寡糖聚合度为1～4。本发明的昆布多糖降解酶具有优良的酶学性质和特异性，在酶法制备昆布寡糖中具有重要的工业应用价值以及经济价值。

技术领域

本发明涉及一种昆布多糖降解酶OUC-BsLam26的重组表达、制备及其应用，属于功能基 因克隆表达技术领域。

背景技术

昆布多糖(Laminarin)是一种来源于褐藻的海洋多糖，其结构主要是由D-吡喃葡萄糖 残基通过β-1,3-糖苷键连接与部分β-1,6-糖苷键连接的支链共同构成。昆布寡糖是由昆布 多糖降解得到的聚合度(DP)位于2～10之间的产物，其具有较低的分子量和较高的生物利 用度。近年来经研究证实昆布寡糖具有比昆布多糖更好的生物活性，包括抗氧化、抗凝血、 抗凋亡、调节肠道菌群、骨骼再生修复等众多的生理功能。因此如何高效制备特定聚合度的 昆布寡糖受到了人们的广泛关注。

采用昆布多糖制备昆布寡糖的方法主要包括物理法、化学法以及酶解法。物理法主要通 过超声辅助提取以及γ射线等方法降解昆布多糖；化学法主要通过酸溶液和碱溶液对昆布多 糖进行降解。物理法能耗高，产物不均一，而化学法反应条件较为剧烈，且过多使用化学试 剂，不符合绿色环保等理念。而酶解法不仅反应条件温和，特异性较高，而且获得的水解产 物也较为均一。因此，挖掘一种新的昆布多糖酶并用其制备昆布寡糖具有很大的研究价值和 发展潜力。

人类肠道微生物的相关研究成为当前的热点问题。Bacteroides sp.是来自肠道微生物中 与人类炎症、糖尿病等疾病呈负相关的拟杆菌门成员，具有降解多糖和碳水化合物的能力， 是一种理想的挖掘宿主。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种可以降解昆布多糖产生昆布寡糖的新型降解酶— —昆布多糖降解酶OUC-BsLam26，弥补了现有酶基因库的不足。

本发明是通过以下技术方案实现的：

昆布多糖降解酶OUC-BsLam26，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

昆布多糖降解酶OUC-BsLam26的氨基酸序列(SEQ ID NO.1)：

MKKIFYSLILSTLMFGACSASDDGVPQTPEDPDGTQEPQEEPVTYTGIQKRSVKRGVSYSFQLPKEDTQMLGSAIS WAYNWGTEISSDLSTEFSKQQIDYCPMSWNANPDIAPKIRRYVNAHPECKYLLAYNEPNLTDQARMTPQEAAAQWPALRA LASELNLKLISPAMNYGTLPDYSDPIKWLDEFFSNVPLSDVDGIAIHCYMESPSSLINYVSMFKKYGKPIWLTEFCAWPS SDKISISSQMNYMSETLHYLESDPDVFRYAWFIPRGIGPTDPSTGTTSNSLLPGKPNALTDLGTVFVNMSTLDKTAYYNK NQVIPAEHYSSINTVENLTSVSAHLRPTTDISGILDVYDLKQEQWLKYQLDAPKAGTYQLDIRYTSFRDNKVEITIDKGT AATLDLPNVDSKWTTVTTNIQLKAGKQTLRIKVTTGNIALNWLRFKD。

一种编码上述昆布多糖降解酶OUC-BsLam26的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

编码昆布多糖降解酶OUC-BsLam26的基因的核苷酸序列(SEQ ID NO.2)：