[发明专利]尿微量白蛋白金标试剂条及其制备方法

说明书

本发明公开了一种尿微量白蛋白金标试剂条，包括底板、依次粘贴在底板上的样品垫、标记垫、NC膜、吸收垫；所述标记垫上标记有含胶体金标记物，标记物为第一尿微量白蛋白单克隆抗体，或同时有鸡IgY；所述NC膜上标记有检测线T线和质控线C线，检测线T线包被有第二尿微量白蛋白单克隆抗体，质控线C线包被有质控抗体与人白蛋白抗原。还公开了一种尿微量白蛋白金标试剂条的制备方法。本发明采用适宜比例的质控抗体与人白蛋白抗原作为混合C线进行包被的方法，具有显著提高尿微量白蛋白金标试剂的检测范围与精密度等各项优点，适用于临床应用检测。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，特别是涉及一种尿微量白蛋白金标试剂条及其制备方法。

背景技术

白蛋白是重要的血浆蛋白质之一，在正常情况下，白蛋白的分子量大，不能越过肾小球基膜，因此，在健康人尿液中仅含有浓度很低的白蛋白。疾病时，肾小球基膜受到损害致使通透性发生改变，任何能够引起肾小球基膜通透性增高的病变，均可导致白蛋白的排出。这个时候白蛋白即可进入尿液中，尿白蛋白浓度即可出现持续升高。通过检查尿液中白蛋白含量可发现肾脏疾病，因此又被称为“尿微量白蛋白”检查。

临床检验中尿微量白蛋白多以生化免疫比浊法为主，该方法适合于批量检测但需要大型仪器，而免疫层析法由于检测快速且不需要大型仪器，在临床检验中占据一席之地。目前尿微量白蛋白免疫层析试剂多以荧光法为主，而胶体金试剂(金标法)由于线性范围限制，不利于在尿微量白蛋白项目中使用。

现有尿微量白蛋白金标试剂分为竞争法与夹心法两种。竞争法多为定性试剂，夹心法为定量试剂，而金标试剂线性范围较窄，高值的分析灵敏度低(分析灵敏度指单位浓度下的信号值变化)，尿微量白蛋白检测要求上限达到200ug/ml以上，因此夹心法金标试剂高值精密度较差。

因此亟需提供一种新型的尿微量白蛋白金标试剂条及其制备方法来解决上述问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种尿微量白蛋白金标试剂条及其制备方法，能够明显改善线性范围，提高整个检测范围内的检测精密度。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种尿微量白蛋白金标试剂条，包括底板、依次粘贴在底板上的样品垫、标记垫、NC膜、吸收垫；

所述标记垫上标记有含胶体金标记物，标记物为第一尿微量白蛋白单克隆抗体，或同时有鸡IgY；

所述NC膜上标记有检测线T线和质控线C线，检测线T线包被有第二尿微量白蛋白单克隆抗体，质控线C线包被有质控抗体与人白蛋白抗原。

在本发明一个较佳实施例中，所述质控抗体的浓度为0.05～0.2mg/ml，人白蛋白抗原的浓度为1.0～1.5mg/ml。

进一步的，所述质控线C线包被的质控抗体采用羊抗鼠IgG或羊抗鸡IgY。

为解决上述技术问题，本发明采用的另一个技术方案是：提供一种尿微量白蛋白金标试剂条的制备方法，包括以下步骤：

(1)NC膜包被：

首先配制C线包被液，C线包被稀释液中同时加入质控抗体和人白蛋白抗原；其次配制T线包被液，T线包被液中加入第二尿微量白蛋白单克隆抗体；最后将NC膜贴在底板上，将C线包被液和T线包被液分别按照0.6～1ul/cm和0.8～1.2ul/cm包被至硝酸纤维素膜上，并于37℃干燥后保存；

(2)制作标记垫：

首先制备胶体金，其次在胶体金中标记第一尿微量白蛋白单克隆抗体，当所述质控抗体采用羊抗鸡IgY时还需在胶体金中标记鸡IgY，然后标记物离心纯化后使用重悬液进行重悬，最后将重悬后的标记物喷涂在玻璃纤维膜上，于37℃干燥后保存；

(3)制作样品垫：