[发明专利]一种用于肠息肉、肠腺瘤和/或肠癌筛查诊断的SNORD57检测试剂盒

说明书

本发明提供的一种用于肠息肉、肠腺瘤和/或肠癌筛查诊断的SNORD57检测试剂盒，所述检测试剂盒包含检测SNORD57的SNORD57逆转录引物和/或检测SNORD57的引物探针组合物，所述检测SNORD57的引物探针组合物中包含SNORD57正向引物、SNORD57反向引物和SNORD57探针。本发明针对指核小仁RNA SNORD57提供了特定的逆转录引物和引物组，具有扩增效率高及特异性佳等优点。本发明实现SNORD57的半自动化检测、速度快、灵敏度高且适用样本范围广。

技术领域

本发明涉及分子检测技术领域，具体地，涉及一种用于肠息肉、肠腺瘤和/或肠癌筛查诊断的SNORD57检测试剂盒。

背景技术

核小仁RNA(snoRNA)是一类广泛存在于真核生物细胞核仁的小分子非编码RNA，长度在60～300nt，主要存在于核仁中，起到了RNAs对核糖体RNA和一些剪接体RNA进行转录后修饰的作用分子。snoRNA的表达可能受宿主基因，CNV和DNA甲基化的调控。大量的证据表明了snoRNA在癌症发生发展中的重要性，例如，SNORD78在非小细胞肺癌和前列腺癌中过表达，可以直接结合并抑制K-Ras的SNORDSOA/B在多种癌症类型中被删除；SNORA42表达是癌症患者总体生存时间增加的独立预后因素。前列腺癌细胞系中的SNORA55沉默显着抑制细胞增殖和迁移。snoRNA的功能障碍在癌症的发生发展，侵袭转移中起重要的角色，越来越多研究证明，snoRNA在疾病，尤其是肿瘤的发生和发展过程中起着重要的作用。

SNORD57是核小仁RNA的一种，已有研究发现SNORD57与结直肠癌的发生有密切的关系，可能是肠癌的重要肿瘤标记物。因此，SNORD57有望成为结直肠癌诊断和治疗的新靶点，开发用于SNORD57基因检测的试剂盒有重要的临床意义。研究发现，SNORD57的表达量在息肉、腺瘤及肠癌的血浆/血清标本中呈高表达量，在肠镜正常的标本中呈低表达量，提示SNORD57可以作为息肉、腺瘤及肠癌诊断和筛查的标志物。

国内外关于SNORD57检测方面的报道较少，而直接针对SNORD57设计相应的引物和探针，会造成非特异性扩增。目前尚无快速、简单、有效的SNORD57检测方法。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的上述不足，提供一种用于肠息肉、肠腺瘤和/或肠癌筛查诊断的SNORD57检测试剂盒。

本发明的第一个目的是提供一种检测SNORD57的SNORD57逆转录引物。

本发明的第二个目的是提供一种检测SNORD57的引物探针组合物。

本发明的第三个目的是提供所述的检测SNORD57的SNORD57逆转录引物和/或所述的检测SNORD57的引物探针组合物，在制备肠息肉、肠腺瘤和/或肠癌筛查诊断产品中的应用。

本发明的第四个目的是提供一种检测SNORD57的检测试剂盒。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

本发明在实际制备过程中，根据GenBank获取SNORD57序列，所述的SNORD57是指核小仁RNA，名称为SNORD57或C/D box 57。SNORD57有效序列为原序列或原序列的反向互补序列，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。通过NCBI的BLAST功能分析发现该序列与人的基因组有一定的同源性，说明不能直接针对SNORD57设计相应的引物和探针，会造成非特异性扩增，为了避免此种情况，本发明设计了独特的逆转录引物，其逆转录引物即包含了SNORD57序列又不会造成后续PCR的非特异性。