[发明专利]一种微生物防治三七根腐病剂的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 202111533266.9 | 申请日： | 2021-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN114250176B | 公开（公告）日： | 2023-09-15 |
| 发明（设计）人： | 李一青;胡林芳;苗翠苹 | 申请（专利权）人： | 云南大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;A01N63/28;A01P3/00;C12R1/465 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 650091 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 微生物 防治 三七 根腐病剂 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种微生物防治三七根腐病剂的制备方法，其特征在于该制备方法包括以下步骤:
(1)试管种培养：将保藏号为CCTCC NO：M2018221的链霉菌YIM PH20246(Streptomycessp.YIM PH20246)菌株接种到试管固体培养基斜面上，于28℃的温度下培养6天，获得菌株试管种；
其中，固体培养基配方为：酵母粉4.0g；葡萄糖4.0g；麦芽膏5.0g；复合维生素3.5mg；琼脂粉15.0g；水1000mL；pH 7.2；
(2)培养液体种子：采用500mL三角瓶摇瓶培养，先配制液体种子培养基，在每个三角瓶中装入100mL液体培养基，于120℃的温度下灭菌30分钟，冷却后接入1cm2大的菌株试管种，于28℃的温度下于转速为220rpm的摇床上培养2天，获得液体种子；
其中，液体种子培养基配方为酵母粉4.0g；葡萄糖4.0g；麦芽膏5.0g；复合维生素3.5mg；水1000mL；pH 7.2；
(3)制备微生物防治三七根腐病剂：采用1000mL三角瓶摇瓶培养，先配制液体发酵培养基，在每个三角瓶中装入200mL液体发酵培养基，于120℃的温度下灭菌30分钟，冷却后接入20mL上述步骤(2)中获得的液体种子，在28℃的温度下于转速为220rpm的摇床上培养6天后获得菌株发酵产物，在发酵产物中加入等体积乙醇，经转速为180rpm的摇床振荡6小时后滤去菌丝体，蒸干上清液中的乙醇得到菌株发酵提取物，将该发酵提取物加水稀释到原发酵液浓度，即为试验用微生物防治三七根腐病剂；
其中，液体发酵培养基配方为：葡萄糖30.0g，淀粉10.0g，蛋白胨5.0g，酵母膏5.0g，K2HPO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，CaCO3 2.0g，水1000mL；pH7.0。
2.权利要求1所述方法制备得到的微生物防治三七根腐病剂在防治三七根腐病中的用途。
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