[发明专利]用于检测嗜吞噬细胞无形体抗体的重组蛋白rP44-18ES试剂盒

说明书

本申请提供一种用于检测嗜吞噬细胞无形体抗体的重组蛋白rP44‑18ES试剂盒，试剂盒包括双抗原夹心法金标检测条，检测条包括底板，底板上沿层析方向设置样品垫、金标垫、分析膜和吸水垫，金标垫上设置有金标记的重组蛋白rP44‑18ES和鼠IgG，分析膜上设置有检测线和质控线；检测线为重组蛋白rP44‑18ES，质控线为与鼠IgG结合的抗体。本申请使用重组蛋白rP44‑18ES作为检测HGA抗体的抗原，更加便捷准确，灵敏度高，特异性强，重组蛋白rP44‑18ES与其他病原体无交叉反应，显著降低HGA血清检测中漏检的概率，不需要大型仪器操作，广泛适用于基层医疗机构。

技术领域

本申请涉及医疗技术领域，尤其涉及一种用于检测嗜吞噬细胞无形体抗体的重组蛋白rP44-18ES试剂盒。

背景技术

嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum)属立克次体目无形体科的专性细胞内寄生菌，可引起人粒细胞无形体病(HGA)。嗜吞噬细胞无形体在机体中指向性地感染中性粒细胞，且具有在细胞质中形成类似于桑葚(morula)的寄生性空胞(包涵体)进行复制增殖等特点。嗜吞噬细胞无形体表面有一种关联抗原变异的P44主要外膜蛋白群，是该菌的主要抗原蛋白。

由于人粒细胞无形体病无特异性临床表现，临床症状与某些病毒性疾病相似，早期检测较困难。目前临床中较为直接的检测方法为血涂片染色法，间接荧光抗体试验(Indirect fluorescence antibody，IFA)和酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linkedimmunosorbent assay，ELISA)等免疫学方法，此外PCR(聚合酶链式反应)法也是一种常用于嗜吞噬细胞无形体的检测，是用于检测嗜吞噬细胞无形体病最为敏感和特异性较高的检测方法。

但是上述的免疫荧光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)技术等方法需要使用指定的仪器设备、具备相应的试验条件和技能，难以在基层推广。易产生抗原变异而加大检测难度，由于嗜吞噬细胞无形体的基因组中存在p44多基因家族的重复序列，相同性基因间容易产生交换，因此，机体内表达不同的P44外膜蛋白种类，从而引起抗原变异，难以为人粒细胞无形体病的快速简便检测提供科学依据，同时存在灵敏性、特异性低以及漏检的风险。

发明内容

本申请提供一种用于检测嗜吞噬细胞无形体抗体的重组蛋白rP44-18ES试剂盒，用以解决HGA抗体检测中存在的灵敏度、特异性低以及漏检率高，易产生抗原变异的问题，本申请提供的用于检测嗜吞噬细胞无形体抗体的重组蛋白rP44-18ES，具有灵敏度高、特异性强的优点，同时与其他病原体无交叉反应，且能够显著降低HGA血清检测中漏检的概率，而且所制试剂盒检测方便、高效、准确，不需要大型仪器设备，便于在基层医疗机构广泛推广。

本申请提供一种用于检测嗜吞噬细胞无形体抗体的重组蛋白rP44-18ES试剂盒，试剂盒包括双抗原夹心法金标检测条，检测条包括底板，底板上沿层析方向依次设置样品垫、金标垫、分析膜和吸水垫，金标垫上设置有胶体金复合物，分析膜上设置有检测线和质控线；胶体金复合物包括胶体金标记的重组蛋白rP44-18ES和鼠IgG抗体，检测线包括重组蛋白rP44-18ES，质控线包括与鼠IgG抗体结合的抗体。

双抗原夹心法是一种方便、快捷的检测方法，试剂盒中样品垫用于滴加待测样品，金标垫上浸有纳米金颗粒标记的重组蛋白rP44-18ES和鼠IgG抗体，用于检测时进行显色，分析膜上分布有检测线和质控线，检测线包括重组蛋白rP44-18ES，通过待测样品中是否存在HGA抗体与重组蛋白rP44-18ES发生特异性结合，判断待测样品是否感染HGA病毒，质控线包括与鼠IgG抗体结合的抗体，用来检测金标复合物是否合格。