[发明专利]复合微生物菌剂的制备方法

说明书

本发明属于微生物菌剂的制备，特别是指一种复合微生物菌剂的制备方法。包括将解淀粉芽孢杆菌接入发酵罐内的发酵培养基，通气发酵6～10小时制成发酵液，将胶冻样类芽孢杆菌接入发酵液内通气发酵，镜检观察芽孢形成率达到50％时，将发酵罐内温度升高至35℃～37℃，在1～2小时内罐内芽孢形成率达99％时发酵结束等工艺步骤。本发明解决了现有技术存在的发酵周期长、容易染菌、发酵规模小等技术问题，具有发酵周期短、生产成本低、不易染菌且含菌量高等优点。

技术领域

本发明属于微生物菌剂的制备，特别是指一种复合微生物菌剂的制备方法。

背景技术

微生物菌剂是一类含有特定活性微生物的肥料制品，微生物肥料种类繁多，功能各不相同，随着微生物菌剂产业的发展，复合微生物菌剂由于其具有功能更强、更全面，越来越受到用户的欢迎。

一般的，复合菌剂的制作均为两个或多个菌株单独纯种发酵，发酵完成后进行混合制成复合菌剂。此种方法需要至少两套发酵系统，生产周期长，容易造成交叉感染。

解淀粉芽孢杆菌HM9902是申请人2016年在定兴的山药试验田分离得到，其对重茬种植的山药真菌病害有很好的防效。申请人已于2016年8月8日提交位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.12821。胶冻样类芽孢杆菌HM8841能分泌植物根际促生物质，并能将土壤中的矿质钾降解为可被作物利用的可溶性钾。此菌株已于2013年1月31日提交位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.7240。经对峙培养试验已证明二者无拮抗作用。

在发酵培养基的选择上解淀粉芽孢杆菌和胶冻样类芽孢杆菌比较相似，碳源一般选择玉米粉、淀粉、蔗糖等物质，氮源一般选择玉米浆、豆饼粉、硫酸铵等物质。而麸皮是一种碳源、氮源兼具的发酵原料，且麸皮还含有大量微生物生长所需要的微量元素。红糖相对于蔗糖微量营养成分更丰富，经试验证明更有助于混菌发酵生物量的提高。

申请人检索的背景技术包括：

公开号为CN104402610B的专利文献中公开的玉米追肥专用复合微生物肥料，其中先按5％～10％的接种量将胶冻样芽孢杆菌XK的种子液在发酵罐中培养12～24h,然后再按5％～10％的接种量添加巨大芽孢杆菌C₂的种子液，同时添加混合发酵产芽孢培养基在发酵罐中，进行混菌发酵培养24～48h，制得双菌株混合发酵菌液，混合发酵产芽孢培养基配方为：麸皮1.5％、豆粕1.5％、NaCl 0.5％、CaCL₂ 0.1％、CaCO₃ 0.02％、MnSO₄·H₂O0.02％、MgSO₄·7H₂O 0.02％，pH7.0～7.5。

将混合发酵菌液与灭菌的泥炭土按比例混合搅拌均匀，二者的比例为质量比1:1～2，吸附后得双菌株菌肥。

上述现有技术存在的主要问题是：

一是发酵规模小(只是实验室摇瓶的试验结果)，而从摇瓶发酵规模放大到发酵罐发酵培养并非简单的等比扩大，需反复试验调整培养基及工艺参数才能形成规模发酵工艺。

二是对比文件选用巨大芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌两株肥效菌进行混菌发酵，仅具有较好的肥效。

三是对比文件采用先发酵种子液，而后混合一起发酵的方式，工艺周期长，生产成本高且容易染菌。

四是其制备的固体复合微生物肥料，肥料含菌量2亿/克，亩施50kg取得了很好的应用效果。

申请人未在现有技术中发现与本申请相同或相近似的文献报道。

发明内容