[发明专利]F5-肽和/或P-gp抑制剂在制备跨血睾屏障药物上的应用及口服靶向纳米粒子与药物

说明书

一种F5‑肽和/或P‑gp抑制剂在制备跨血睾屏障药物上的应用及口服靶向纳米粒子与药物，首次提出利用F5‑肽破坏BTB的物理屏障，Tariquidar抑制P‑gp破坏BTB的生化屏障，使BTB瞬间“开放”和“闭合”，basal ES蛋白与紧密连接蛋白不再与基底膜附近的BTB处紧密相连，P‑gp转运蛋白无法将外源性药物Adjudin泵出BTB，从而使得Adjudin顺利转运至生精上皮，提出构建携带活性Adjudin分子的FAF5T‑LAN口服靶向纳米制剂，并有望成为高依从性的男性避孕药，具有重要的社会意义与经济价值。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及F5-肽和/或P-gp抑制剂在制备跨血睾屏障药物上的应用及口服靶向纳米粒子与药物。

背景技术

睾丸生精上皮是精子发生过程的起点，主要由连接在基底膜上的支持细胞及多种生殖细胞构成，而支持细胞之间的多种细胞间连接构成了血睾屏障（BTB）。BTB的存在阻止了有害物质由血液进入睾丸生精上皮，但同时也阻止了大部分小分子药物和大分子药物（例如肽，蛋白质和基于基因的药物）的转移。研究表明，BTB不仅阻碍了药物（如避孕药，抗病毒药物）在生精小管内的运输，使得药物无法直接作用于生精上皮近腔室区域，而且使得抗逆转录病毒无法完全清除生精小管内的病毒，睾丸便成为病毒的潜在储蓄池，进而使得寨卡病毒、HIV、COVID-19等病毒性疾病的复发风险明显增加，严重限制了睾丸相关疾病（例如睾丸癌、睾丸感染、睾丸损伤等）的治疗。

在哺乳动物的睾丸中，支持细胞（Sertoli cell，Sertoli细胞）与精子细胞之间的粘着连接称为顶端外质特化（apical Ectoplasmic Specialization，apical ES），Sertoli细胞之间的粘着连接称为基底外质特化（basal Ectoplasmic Specialization，basalES）。BTB主要由位于生精上皮基底膜附近相邻的Sertoli细胞间形成的紧密连接构成，除此之外，basal ES、间隙连接以及基于中间丝的桥粒也参与了BTB的构成（图1）。BTB将生精上皮分隔成基底室和近腔室，为精子的形成创造了相对独立的微环境。啮齿动物生精周期的第VIII-IX期，相当于人类的生精上皮周期第VI-VII 期，精母细胞作为一种特殊的细胞群，通过细胞间桥穿越BTB，与此同时，成熟的精子也在曲细精管管腔附近释放。虽然这两个细胞事件发生在生精循环的的同一阶段，却位于生精小管中相对的两端。

BTB具有物理和生化屏障功能，它显著限制了药物向睾丸的转运。首先，BTB虽然为精子发生提供了良好的微环境，却也限制了水、电解质、离子、激素、旁分泌因子等细胞旁路和跨细胞途径的扩散和运输，同时也极大地限制了药物的跨屏障转运，例如，小型亲水性药物和无法轻易跨越脂质双分子层扩散的大分子药物（如抗体和抗体-药物结合物）等。因此，抑制BTB的物理屏障功能，使BTB瞬时“开放”，对于药物跨越BTB的转运十分重要。

发明内容

为了解决现有技术存在的技术缺陷，本发明提供了一种F5-肽和/或P-gp抑制剂在制备跨血睾屏障药物上的应用及口服靶向纳米粒子与药物，促进药物跨越这一屏障进入BTB后的生精上皮管腔内发挥作用，为跨屏障药物的研发提供新思路，具有重要的社会意义和经济价值。

本发明采用的技术解决方案是：F5-肽在制备跨血睾屏障药物上的应用。

所述的F5-肽的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。

所述的跨血睾屏障药物包括F5-肽的DNA序列，通过递送至体内合成F5-肽。

P-gp抑制剂在制备跨血睾屏障药物上的应用。

所述的P-gp抑制剂为选择性、非竞争性的P-gp抑制剂Tariquidar。

F5-肽和P-gp抑制剂Tariquidar在制备跨血睾屏障药物上的应用。