[发明专利]一种肉豆蔻酰五肽-4的合成方法

说明书

本发明提供一种肉豆蔻酰五肽‑4的合成方法，属于生物化学材料合成领域，包括用二甲基酰胺和蓖麻油酸活化树脂；将Fmoc保护的氨基酸与缩合剂，消旋试剂混合，加入有机溶剂溶解，再加入活化剂活化后，与脱保护的树脂反应，连接到树脂上，采用此方法依次连接Fmoc‑Lys(Boc)‑OH、Fmoc‑Lys(Boc)‑OH、Fmoc‑Ala‑OH﹑Fmoc‑Leu‑OH，Fmoc‑Lys(Boc)‑OH，得到五肽树脂，加入肉豆蔻酰氯、活化剂、二氯甲烷反应，对得到的肽树脂进行切割、纯化，得到肉豆蔻酰五肽‑4。本发明提供的一种肉豆蔻酰五肽‑4的合成方法具有操作简单，成本较低，产率和纯度较高的优点。

技术领域

本发明属于生物化学材料合成领域，具体涉及一种肉豆蔻酰五肽-4的合成方法。

背景技术

肉豆蔻酰五肽-4（Myristoyl Pentapeptide-4），又称肉豆蔻酰五肽-17，是一种能够明显促进睫毛生长的美容肽，它能直接激活角质蛋白基因的表达，进而使睫毛生长，变得浓密。

目前，多肽的化学合成主要分为液相合成和固相合成两种方法，多肽固相合成法因具有操作简便，副产物少，易于纯化等优点，自创立以来被广泛应用到多肽的合成研究中。多肽固相合成C端向N端延伸的原理为：将目标肽链的首个氨基酸的羧基和固相载体以共价键结合，然后下一个氨基保护氨基酸在化学试剂下于之发生缩合反应，反复重复如此反应，直到目标肽链连接完成为止。最后将该肽链切割下来，纯化得到所需多肽。固相多肽合成中一般要先将氨基酸的α-氨基和侧链活性基团保护。Boc（叔丁氧羰）和Fmoc（9-芴亚甲氧羰）两种基团被广泛使用来保护α-氨基。Fmoc保护与Boc保护相比，Fmoc在酸性条件下比较稳定，反应条件温和，副产物少，切割条件温和，合成效率高。

现有技术如授权公告号为CN 103897053 B的中国发明专利，公开了一种化学修饰的胸腺肽α1及其合成方法，其具有以下结构：A-Ser-Asp-AlaAla-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-IIe-Thr-ThrLys-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-Val-ValGlu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH或Ac-Ser-Asp-AlaAla-Val-Asp-Thr-Ser-Ser-Glu-IIe-Thr-ThrLys(A)-Asp-Leu-Lys-Glu-Lys-Lys-Glu-ValVal-Glu-Glu-Ala-Glu-Asn-OH，所述A为与人血清白蛋白亲和性结合的脂肪酸，或与人血清白游离巯基偶联的马来酰亚胺衍生物。本发明的化学修饰的胸腺肽α1修饰位点精确，化学结构明确，合成方法工艺简练，经化学修饰的胸腺肽α1在静脉注射后立即特异性地与人体自身的血清白蛋白结合，将以人体自身的血清白蛋白作为缓释载体，从而大大延长其半衰期，显著增加有效药物浓度的持续时间，生物利用度高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种肉豆蔻酰五肽-4的合成方法，该方法能够促进树脂的溶胀，提高首个氨基酸的连接率，提高Fmoc基团的脱除率，降低生产成本，提高产品的产率。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

提供一种肉豆蔻酰五肽-4的制备方法，该肉豆蔻酰五肽-4的结构为Myristoyl-Lys-Leu-Ala-Lys-Lys-NH₂，其制备方法包括以下步骤：

S1、将Rink Amide AM树脂溶于有机溶剂二甲基甲酰胺和蓖麻油酸中浸泡10-25min后，抽滤，得到活化的树脂；上述有机溶剂包括二甲基甲酰胺和蓖麻油酸；上述RinkAmide AM树脂与有机溶剂的质量体积比为1g:5-9mL；