[发明专利]一种提高海藻糖收率的生产方法

权利要求书

1.一种提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)菌株利用发酵基质进行发酵繁殖，并通过对发酵罐尾气分析获得的CER数据反馈控制补糖的流加速率；

(2)发酵终点，将发酵液分离，得发酵菌体和发酵废液；

(3)将所述发酵菌体破壁，得海藻糖合成酶；

(4)将所述海藻糖合成酶作用于麦芽糊精，得海藻糖A液；

(5)将所述发酵废液与所述海藻糖A液合并，进一步纯化分离，得海藻糖成品和结晶母液；将所述结晶母液作为步骤(1)补糖来源；

其中，步骤(1)所述CER数据反馈控制补糖的流加速率具体为：通过调整流加速率控制总CER值与发酵时间的斜率；当总CER值＜40时，控制斜率在3-4；当总CER值≥40时，控制斜率在8-9。

2.根据权利要求1所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(1)所述菌株为BW25113-TRS大肠杆菌；发酵温度37-37.5℃；溶氧20-30％。

3.根据权利要求2所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(1)发酵基质每升包括28g KH₂PO₄、12g(NH₄)₂HPO₄、8g柠檬酸、7.6g七水硫酸镁和10g微量元素；

且，发酵基质每升还包括1g诱导剂L-阿拉伯糖，所述L-阿拉伯糖在发酵液OD₆₀₀值大于30时加入，加入后降低发酵温度至28-30℃。

4.根据权利要求1所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(2)发酵终点为发酵液OD₆₀₀值大于120；

步骤(2)所述发酵液采用膜分离，孔径为30-50nm。

5.根据权利要求1所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(3)所述发酵菌体采用均质破壁，均质压力80-100MPa，流速1m³/h。

6.根据权利要求1所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(4)海藻糖合成酶与麦芽糊精的重量体积比为0.3％；海藻糖合成酶的作用温度37-40℃，时间12-14h。

7.根据权利要求1所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(5)所述发酵废液与海藻糖A液体积比小于10％；

步骤(5)所述纯化分离依次经纯化脱色、离交脱盐、蒸发浓缩、色谱分离、冷却结晶、离心分离实现。

8.根据权利要求7所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(5)经一次纯化分离，得一次海藻糖成品和一次结晶母液；

再将一次结晶母液重复所述蒸发浓缩、色谱分离、冷却结晶和离心分离环节，得二次海藻糖成品和二次结晶母液。

9.根据权利要求8所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，步骤(5)所述蒸发浓缩的终点可溶性糖含量65-68％；所述色谱分离的效果海藻糖纯度大于95％。

10.根据权利要求9所述的提高海藻糖收率的生产方法，其特征在于，将二次结晶母液作为补糖应用于步骤(1)。