[发明专利]一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法

权利要求书

1.一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)菌种经发酵、声悬浮处理后得到声悬浮菌液；

2)对原煤经破碎、研磨、筛分得到煤粉；

3)煤粉浸泡于硝酸溶液中，经洗涤、过滤后，取固体干燥，得到煤样；

4)将步骤3)的煤样先加入至液体培养基中形成煤浆，经灭菌后，继续向煤浆中加入步骤1)的声悬浮菌液，混合、离心后取固相产物，清洗、烘干、称重，计算煤降解率。

2.根据权利要求1所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤1)中，菌种为地衣芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌或短小芽胞杆菌。

3.根据权利要求2所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤1)中，声悬浮的条件是，功率150～500W，时间0.5～4min。

4.根据权利要求3所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤1)中，声悬浮的条件是，功率150～350W，时间0.5～3min。

5.根据权利要求1所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤3)中，浸泡时间为12～48h，干燥温度80～120℃，干燥时间为6～12h。

6.根据权利要求1所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤4)中，煤样、液体培养基和声悬浮菌液用量的质量体积比为0.1～1.5g：50mL：5～50mL；所述煤样粒径为0.5～0.075mm。

7.根据权利要求6所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤4)中，液体培养基是由10.0g蛋白胨、10.0g牛肉膏、5.0g NaCl、20.0g琼脂以及1L蒸馏水配制而成的；液体培养基的pH＝7.2。

8.根据权利要求7所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤4)中，灭菌温度为121℃，灭菌时间为10～20min，混合温度为20～40℃，离心速度8000～12000r/min，离心时间10～30min，烘干温度80～120℃，烘干时间为6～12h。

9.根据权利要求8所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤4)中，混合过程是在摇床中进行，摇床的转速为100～180r/min。

10.根据权利要求9所述的一种利用声悬浮仪筛选微生物用于降解煤炭的方法，其特征在于，所述步骤4)中，煤降解率m₀为煤样质量；m为固相产物质量。