[发明专利]马流产沙门氏菌竞争ELISA抗体检测试剂盒及其应用有效
申请号: | 202111444112.2 | 申请日: | 2021-11-30 |
公开(公告)号: | CN114231496B | 公开(公告)日: | 2023-05-26 |
发明(设计)人: | 胡哲;郭奎;王晓钧 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) |
主分类号: | C12N5/20 | 分类号: | C12N5/20;C07K16/12;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 马鑫 |
地址: | 150009 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 流产 沙门氏菌 竞争 elisa 抗体 检测 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种分泌抗马流产沙门氏菌(Salmonella abortus equi,S.abortus.equi)FljB蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其特征在于,所述的杂交瘤细胞株命名为S-FljB-1A10,保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,其菌种保藏编号为:CGMCCNo.21990,保藏日期为2021年4月1日。
2.权利要求1所述的杂交瘤细胞株分泌产生的抗马流产沙门氏菌FljB蛋白的单克隆抗体。
3.权利要求2所述的单克隆抗体在制备检测马流产沙门氏菌抗体试剂中的用途。
4.如权利要求3所述的用途,其特征在于,所述的试剂为竞争ELISA抗体检测试剂。
5.一种马流产沙门氏菌竞争ELISA抗体检测试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中含有权利要求2所述的单克隆抗体。
6.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述的单克隆抗体作为包被抗体。
7.如权利要求5所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒中还含有5%w/v的NCS封闭液、HRP标记的FljB蛋白、洗涤液、双组份TMB显色液以及终止液。
8.如权利要求7所述的试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒用于检测马流产沙门氏菌抗体时,按照以下步骤进行:
(1)使用2μg/mL的权利要求2所述的单克隆抗体包被酶标板4℃过夜后,用洗涤液洗涤,37℃下用5%w/v的NCS封闭2h,洗板;
(2)将HRP标记的FljB蛋白与对照或待测血清样品按照体积比1:1混合后加入板中,37℃孵育30min,洗板;
(3)加入双组份TMB显色液,37℃显色10min,最后加终止液终止反应,测定OD450nm值,计算抑制率,当抑制率41.5%时,判定为阳性。
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