[发明专利]禽副黏病毒PCR通用检测引物、诊断试剂及试剂盒

说明书

本发明公开了一种禽副黏病毒PCR通用检测引物、诊断试剂及试剂盒，所述引物的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。本发明可检测家禽和野鸟出现的所有血清型禽副黏病毒感染，电泳产生条带单一且明亮，结果易于观察。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种禽副黏病毒PCR通用检测引物、诊断试剂及试剂盒。

背景技术

禽副粘病毒(Avian paramyxoviruses，APMV)，又称为禽腮腺炎病毒(Avianavulaviruses，AAvV)，属于副粘病毒科的Avulavirinae亚科。禽副粘病毒能感染世界范围内的多种鸟类，宿主谱广，临床症状不一。到目前为止，禽副黏病毒已经确定了22种血清型(APMV-1到-22)。其中，APMV-1、-2、-3、-6和-7的感染可导致禽类发病。APMV-3和-4主要感染野鸟，APMV-6的主要宿主是野鸭，APMV-7主要从鸽子中分离到。APMV-1即新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)，新城疫是一种发生在家禽和野生鸟类中的高度接触性、死亡率高的传染病，主要表现为呼吸困难、神经紊乱、排绿色稀便、黏膜出血等临床症状，给全球养禽业造成极大的经济损失。被世界动物卫生组织(OIE)列为必须通报动物疾病，被我国农业农村部和海关总署列为一类动物传染病。

现国内外已经建立了各种RT-PCR检测方法来检测禽副黏病毒。但大多数检测方法只针对禽副黏病毒的一种血清型，并且可能无法检测到新出现的血清型(如APMV-14到-22)。因此，建立一种特异性强、敏感性高，且能同时检测所有血清型的快速有效的检测方法，对于野生和家养禽的持续监测，对于开展疫病的早期诊断、防止疫情蔓延具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明旨在提供一种禽副黏病毒PCR通用检测引物、诊断试剂及试剂盒。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明提供一种禽副黏病毒PCR通用检测引物，所述引物的序列为：

上游引物：5’-TTTATAACAACTGACCTGCAAAAGTA-3’；

下游引物：5’-CTTGATTGTCACCTTGTACCATGCAG-3’。

本发明提供一种上述禽副黏病毒PCR通用检测引物在制备禽副黏病毒PCR通用诊断试剂中的应用。

本发明提供一种禽副黏病毒PCR通用检测试剂盒，包含上述禽副黏病毒PCR通用检测引物。

进一步地，所述禽副黏病毒PCR通用检测试剂盒包含2×Taq Mix10μL、10μM的上游引物和10μM的下游引物各0.5μL、ddH₂O 8μL、cDNA模板1μL。

本发明的有益效果在于：

1.本发明可检测家禽和野鸟出现的各种血清型禽副黏病毒感染，电泳产生条带单一且明亮，结果易于观察，具有有较好的通用性。

2.本发明操作简单，灵敏度较高，只需用到一对特异性引物，且无兼并引物，操作简单；将禽副黏病毒cDNA进行10倍系列稀释后，发现进行10³倍稀释后利用本方法检测结果仍为阳性，表明该方法具有较高的灵敏度。

附图说明

图1为本发明实施例2中实验一的电泳结果图；

图2为本发明实施例2中实验二的电泳结果图；

图3为本发明实施例2中实验三的电泳结果图；

图4为本发明实施例2中实验四的电泳结果图。

具体实施方式