[发明专利]一种牛乳铁蛋白肽融合蛋白、编码基因和保鲜剂及其在水果保鲜中的应用

说明书

本发明属于食品技术领域，具体涉及一种牛乳铁蛋白肽融合蛋白、编码基因和保鲜剂及其在水果保鲜中的应用。本发明提供了一种从N端至C端包括依次连接的牛乳铁蛋白肽、单链DNA结合蛋白和绿色荧光蛋白的牛乳铁蛋白肽融合蛋白。利用本发明所述融合蛋白能够长时间维持水果的新鲜度。

技术领域

本发明属于食品技术领域，具体涉及一种牛乳铁蛋白肽融合蛋白、编码基因和保鲜剂及其在水果保鲜中的应用。

背景技术

荔枝是中国南方著名水果，因其甜美的口味、半透明的白色假种皮和诱人的红色果皮而在世界市场上备受推崇。但荔枝成熟于夏季高温期，含糖量高，采摘后极易腐败变质或果皮褐变，限制了市场适销性和潜在的需求扩大。病原菌感染是造成荔枝腐败的主要原因，而白地霉(Geotrichum candidum)是荔枝酸腐病的主要病原物。

牛乳铁蛋白肽(LfcinB)是由25个氨基酸残基组成的阳离子抗菌肽，分子量为3.1kDa。牛乳铁蛋白在酸性条件下经胃蛋白酶水解可得到牛乳铁蛋白肽。牛乳铁蛋白肽对马苏里拉奶酪中五种潜在腐败细菌具有抑制作用，可明显延缓假单胞菌和大肠菌群的生长，这为其应用于奶酪保鲜提供了直接的证据。但牛乳铁蛋白肽在食品中应用过程中因其稳定性不高，限制了其作为保鲜剂的效果。

发明内容

本发明的目的在于提供一种牛乳铁蛋白肽融合蛋白、编码基因和保鲜剂及其在水果保鲜中的应用。利用本发明所述融合蛋白能够长时间维持水果的新鲜度。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供了一种牛乳铁蛋白肽融合蛋白，从N端至C端包括依次连接的牛乳铁蛋白肽、单链DNA结合蛋白和绿色荧光蛋白。

优选的，所述牛乳铁蛋白肽融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.15所示。

本发明提供了上述技术方案所述牛乳铁蛋白肽融合蛋白的编码基因，所述编码基因的核苷酸如序列SEQ ID No.1所示。

本发明提供了一种插入有上述技术方案所述编码基因的重组表达载体。

本发明提供了一种工程菌，包含上述技术方案所述的重组表达载体。

本发明提供了上述技术方案所述牛乳铁蛋白肽融合蛋白或上述技术方案所述的编码基因或上述技术方案所述的重组载体或上述技术方案所述的工程菌在制备水果保鲜剂中的应用。

本发明提供了一种水果保鲜剂，所述的保鲜剂的有效成分包括上述技术方案所述牛乳铁蛋白肽融合蛋白或利用上述技术方案所述的工程菌产生的融合蛋白。

本发明提供了上述技术方案所述牛乳铁蛋白肽融合蛋白或利用上述技术方案所述的工程菌产生的融合蛋白或上述技术方案所述的保鲜剂在水果保鲜中的应用。

优选的，所述水果包括荔枝和/或芒果。

本发明提供了一种水果保鲜的方法，包括以下步骤：

将上述技术方案所述的保鲜剂浸泡水果或喷洒于水果表面。

有益效果：

本发明提供了一种从N端至C端包括依次连接的牛乳铁蛋白肽、单链DNA结合蛋白和绿色荧光蛋白的牛乳铁蛋白肽融合蛋白。本发明首先构建了牛乳铁蛋白肽(LfcinB)与单链DNA结合蛋白(TaqSSB)的融合蛋白表达体系，能够降低牛乳铁蛋白肽对宿主细胞的毒性，提高其在表达体系内的稳定性，保证所述融合蛋白的能够有效抑制水果中优势腐败菌的生长，同时TaqSSB具有较高的耐热性，能够保证本发明所述的融合蛋白在高于90℃的的条件下保持活性；绿色荧光蛋白(EGFP)能够直观地观察蛋白表达情况，便于生产全过程的质量控制。本发明具体实施例结果表明：采用本发明所述融合蛋白的处理在第4天仅少量水果出现轻度霉变，水果果皮新鲜度明显优于未处理组，因此本发明所述融合蛋白能够有效的抑制水果中的腐败菌，保证水果的新鲜度。