[发明专利]氯羟吡啶人工抗原合成法及其在胶体金试剂盒中的应用有效
| 申请号: | 202111390590.X | 申请日: | 2021-11-23 |
| 公开(公告)号: | CN113817045B | 公开(公告)日: | 2022-02-25 |
| 发明(设计)人: | 陈智卿;杨晓霞;李金戈;赵荣茂 | 申请(专利权)人: | 北京纳百生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C07K14/765 | 分类号: | C07K14/765;G01N33/53;G01N33/532;G01N33/543;G01N33/558;C07D213/68 |
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| 地址: | 100176 北京市大兴区北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 吡啶 人工 抗原 成法 及其 胶体 试剂盒 中的 应用 | ||
1.一种氯羟吡啶人工抗原合成法,其特征在于,所述人工抗原合成法包括以下步骤:
步骤一,氯羟吡啶钠盐的制备
取氯羟吡啶,加入NaOH水溶液中,振荡超声至完全溶解,室温下反应0.5-1.5h后,停掉反应,减压蒸馏除去水分,常温下水洗生成物、抽滤、干燥,得氯羟吡啶钠盐;
步骤二,含有羧基的半抗原的制备
取氯羟吡啶钠盐,用三氯甲烷完全溶解,加入四丁基溴化铵,搅拌得A液;称取氯乙酸溶解在超纯水中,加入到A液中,50-80℃反应过夜,经过抽滤,干燥,萃取得到含有羧基的半抗原;
步骤三,人工抗原的制备
称取纯化的氯羟吡啶半抗原,溶解在DMF中,搅拌,得氯羟吡啶半抗原溶液;称取NHS,EDC,溶解到水中,加入到氯羟吡啶半抗原溶液中活化过夜,得活化氯羟吡啶半抗原溶液;
称取BSA溶于PBS溶液中,低温缓慢滴入到活化氯羟吡啶半抗原溶液中,室温搅拌反应1.5-2.5h;用PBS溶液在低温下透析,每天换透析液,透析分装,即得人工抗原,保存。
2.根据权利要求1所述一种氯羟吡啶人工抗原合成法,其特征在于,所述步骤三中,所述低温为4℃。
3.根据权利要求1所述一种氯羟吡啶人工抗原合成法,其特征在于,所述步骤二中,所述含有羧基的半抗原的结构式为:
。
4.根据权利要求1所述一种氯羟吡啶人工抗原合成法,其特征在于,所述人工抗原合成路径为:
。
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