[发明专利]液质联用测定甲磺酸雷沙吉兰中基因毒性杂质含量的方法

说明书

本发明属于分析测试技术领域，具体为以2‑Cl‑AAI、(trans)3‑Cl‑AAI、(cis)3‑Cl‑AAI为标准曲线溶液，液相色谱‑质谱联用法检测甲磺酸雷沙吉兰中基因毒性杂质2‑Cl‑AAI、(trans)3‑Cl‑AAI、(cis)3‑Cl‑AAI的含量。本发明具有良好的专属性和系统精密度，溶液在室温条件下12hr稳定，2‑Cl‑AAI在浓度为0.2536～5.0717ng/mL范围内峰面积与浓度线性关系良好，(trans)3‑Cl‑AAI在浓度为0.2573～5.1459ng/mL范围内峰面积与浓度线性关系良好，(cis)3‑Cl‑AAI在浓度为0.2518～5.035ng/mL范围内峰面积与浓度线性关系良好，方法的回收率均在98.5～101.3％之间，重复性、中间精密度均满足要求，且具有较低的检出限(0.25ng/mL、0.26ng/mL、0.076ng/mL)和定量限(0.51ng/mL、0.51ng/mL、0.25ng/mL)。

技术领域

本发明属于分析测试技术领域，尤其涉及一种液相色谱-质谱联用法对甲磺酸雷沙吉兰中基因毒性杂质2-Cl-AAI、(trans)3-Cl-AAI、(cis)3-Cl-AAI含量的测定方法。

背景技术

随着老龄化社会的来临，帕金森病(PD)患病率在世界范围内正在日益增高。已成为继肿瘤、心脑血管病之后中老年人的“第三杀手”(参见：中老年人“第三杀手”我国帕金森病病人近300万.http://china.huanqiu.com/hot/2017-04/10432361.htmL？agt＝15438)。雷沙吉兰是一种高效、高选择性、非可逆的B型单胺氧化酶(MAO-B)抑制剂。该酶为一种参与脑内多巴胺代谢性降解的酶，当受抑制后，多巴胺的传递信号增强，对帕金森病有益，也可增强左旋多巴的作用(参见：卫生部合理用药专家委员会.中国医师药师临床用药指南[M]，1版，重庆：重庆出版社，2009：1160-1161)。所有研究结果表明，甲磺酸雷沙吉兰不论是单独使用或与其他药物合用，耐受性及安全性皆良好，该品种现已在包括美国、以色列、中国和欧洲在内的四十多个国家和地区上市。自在美国和欧盟批准上市以来，其疗效和安全性获得了广泛认可。

甲磺酸雷沙吉兰结构中含有三键，在合成过程中如果有氯元素的存在，可能会与三键反应生成痕量的氯代雷沙吉兰杂质(Cl-AAI)，由于氯元素加成的位置可能会有不同，由此会衍生出三个氯代雷沙吉兰杂质，即2-Cl-AAI、(trans)3-Cl-AAI、(cis)3-Cl-AAI。Cl-AAI作为基因毒性杂质，其含量是甲磺酸雷沙吉兰质量评价的重要指标。根据ICH M7指导原则中毒理学关注阈值(TTC)要求，对于基因毒性及有致癌风险杂质均规定为日最大摄入量≤1.5μg/天，而在实际生产中，更严格的控制标准可以有效地避免风险。因此，需要开发一种灵敏度更高、选择性更强的检测方法。液相色谱-质谱联用作为一种色谱与质谱联用的技术，是基因毒性杂质检测常用的手段，通过液相色谱-质谱联用技术，建立一种快速、准确、方便的Cl-AAI含量检测方法，对于监控药品的质量，保障用药安全十分必要。

附：

N-(2-氯烯丙基)-1(R)-氨基茚满(2-Cl-AAI)US7572834 B1

顺式-N-(3-氯烯丙基)-1(R)-氨基茚满((cis)3-Cl-AAI)US7572834 B1

反式-N-(3-氯烯丙基)-1(R)-氨基茚满((trans)3-Cl-AAI)US7572834 B1

发明内容

目前，关于甲磺酸雷沙吉兰中Cl-AAI杂质的检测尚没有文献报道，本发明提供一种液相色谱-质谱联用法对甲磺酸雷沙吉兰中基因毒性杂质2-Cl-AAI、(trans)3-Cl-AAI、(cis)3-Cl-AAI含量的测定方法，本方法能快速、准确、方便的检测三种Cl-AAI的含量，具有良好的专属性和系统精密度。