[发明专利]一种核酸扩增结果判定方法有效
申请号: | 202111361628.0 | 申请日: | 2021-11-17 |
公开(公告)号: | CN114058683B | 公开(公告)日: | 2022-09-30 |
发明(设计)人: | 周艳琼;罗凯;尤其敏;帅金晓;林艺志 | 申请(专利权)人: | 杭州优思达生物技术有限公司 |
主分类号: | G16H50/70 | 分类号: | G16H50/70 |
代理公司: | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人: | 张解翠 |
地址: | 310051 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 核酸 扩增 结果 判定 方法 | ||
1.一种核酸扩增结果判定方法,其特征在于,包括以下步骤:
获取不同循环数的荧光强度数据,并对荧光强度数据进行曲线拟合,得到拟合函数;
根据粒子群优化算法计算拟合函数的最优参数,将最优参数代入拟合函数,并对拟合函数进行一阶导数求解,其中,根据粒子群优化算法计算拟合函数的最优参数,包括以下步骤:初始化荧光信号所形成的粒子群,将粒子群分为若干个局部子集,并对局部子集进行迭代计算,得到结果子集,并将所述结果子集存储于最优参数集内,
具体地,对局部子集进行迭代计算,包括以下步骤:设定学习率α和参数θ的初始值,并通过模型计算粒子当前位置所对应的目标位置,同时计算损失函数;根据适应度函数计算粒子个体的适应值;将所述损失函数沿参数θ的负梯度方向更新,并得到损失函数最小值;计算粒子个体的局部最优位置向量和粒子群的全局最优位置向量,并根据损失函数分别更新粒子个体的速度向量和位置向量;根据所述粒子个体的速度向量和位置向量,更新粒子个体的局部位置向量和全局位置向量,并存入结果子集中;判断更新后的局部子集的损失函数的大小,得到更优解,并将最优解存入最优参数集;判断粒子群是否满足参数优化后的终止条件,若满足,则停止迭代计算;若不满足,则重新设定学习率并重新计算粒子个体的适应值,
其中,所述拟合函数的计算公式为:
且θ=(θ1,θ2,θ3,θ4,θ5,θ6,θ7,θ8),θ1、θ2、θ3和θ4部分函数为对正常的扩增S型曲线进行拟合,对荧光扩增曲线数据的非线性特征参数进行调节;θ5是对荧光扩增曲线数据的不同平移进行拟合;θ6、θ7和θ8是对荧光扩增曲线数据的线性特征的斜率进行调节;hθ(t)代表在t时间点的拟合函数对荧光强度的预测值;
根据所述一阶导数,通过求导计算荧光信号上升或下降的连续次数;
设定状态阈值G,并设定荧光信号上升或下降的连续次数大于状态阈值G时,荧光信号上升或下降的连续区间为第一区间;
获取所述第一区间的扩增幅度,并设定扩增幅度阈值D,判断是否第一区间的拟合函数的数值大于0,且第一区间的扩增幅度大于扩增幅度阈值D;
若是,则第一区间为扩增区间,且扩增曲线为潜在阳性曲线;若否,则扩增曲线为阴性曲线;
根据所述一阶导数计算二阶导数,并得出二阶导数的最大值的解和最大值的解对应的时间T;
判断时间T是否在扩增区间内,若是,则判定时间T即为Ct值,并根据样本定义阈值,判断扩增结果;若否,则判断时间T与扩增区间的位置关系;
若时间T位于扩增区间的起始位置之前,则直接定义Ct值为一分钟位置,且扩增结果为阳性;若时间T位于扩增区间的结束位置之后,则直接定义Ct值为四十分钟位置,且扩增结果为阴性。
2.根据权利要求1所述的一种核酸扩增结果判定方法,其特征在于,所述损失函数的公式为:
其中,J(θ)为损失函数;m代表样本个数;i代表m个样本中的第i个样本;hθ(ti)代表第i个样本在t时间点的拟合函数对荧光强度的预测值;yi代表第i个样本的真实荧光强度数据。
3.根据权利要求2所述的一种核酸扩增结果判定方法,其特征在于,将所述损失函数沿参数θ的负梯度方向更新的更新公式为:
4.根据权利要求1所述的一种核酸扩增结果判定方法,其特征在于,判断粒子群是否满足参数优化后的终止条件,包括以下步骤:
设定参数θ一次迭代的变化值为Δθ,若Δθ<0.0001,则结果收敛,判断结果收敛速度,并根据结果收敛速度判断是否满足终止条件;若Δθ≥0.0001,则结果不收敛,不满足终止条件,迭代继续,并减小学习率α的初始值,计算损失函数。
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