[发明专利]术后腔内化疗/免疫协同治疗的缓释凝胶递药系统及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种术后腔内化疗/免疫协同治疗的缓释凝胶递药系统及其制备方法和应用。该缓释递药体系由温度敏感的凝胶材料作为骨架嵌入PTX前药靶向纳米粒以及CpG靶向聚合物纳米粒制成的递药体系；其中，温度敏感的凝胶材料为聚(乳酸‑羟基乙酸)‑聚(乙二醇)‑聚(乳酸‑乙醇酸)三嵌段共聚物。本发明将化学治疗与免疫治疗相结合，双管齐下，杀伤残留胶质瘤细胞，发挥协同治疗的作用，还能达到缓慢释放药物，原位治疗胶质瘤的目的。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种原位缓释凝胶递药系统构建以及在胶质瘤术后腔内进行化疗/免疫协同治疗的应用。

背景技术

脑胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统(Central nervous system，CNS)肿瘤，约占所有原发性CNS肿瘤的80％。脑胶质瘤恶性程度高，治疗效果不理想，预后极差且死亡率极高，其中位生存期小于18个月，5年生存率不足3％。目前脑胶质瘤在临床上的治疗手段主要包括外科手术、术后化疗与放疗等，且在大多数情况下，手术切除是首要选择。然而，胶质瘤多生长在重要脑功能区，且呈浸润性生长，与正常脑组织无明显界限，所以外科手术难度大，不可能完全切除肿瘤细胞，残留的少量浸润胶质瘤细胞和因手术激活的休眠期胶质瘤细胞迅速进入增殖期，造成术后短期内肿瘤复发而导致死亡。目前临床上对胶质瘤术后患者进行全身系统化疗都是在手术2周后进行。全身系统化疗不仅难以克服血脑屏障(BBB)，而且破坏机体免疫系统，从而加剧胶质瘤微环境的免疫抑制，促进胶质瘤细胞的免疫逃逸。因此，胶质瘤术后腔内化疗是胶质瘤术后治疗重要策略。

紫杉醇(PTX)是目前已发现最优秀的天然抗癌药物，体外显示出非常强的胶质瘤细胞毒性。研究显示，PTX不仅可以直接杀伤胶质瘤细胞，还可以诱导其凋亡，释放钙网蛋白(Calreticulin，CRT)以及高迁移率蛋白1(High mobility group box 1protein，HMGB1)等损伤相关分子模式(Damage-associated molecular pattern，DAMP)肿瘤抗原，增强肿瘤免疫原性。但由于血脑屏障和血脑肿瘤屏障(Blood-brain tumor barrier，BBTB)的存在，使得PTX难以进入脑组织和肿瘤部位。所以目前对PTX抗胶质瘤研究主要集中在PTX脑靶向纳米递药系统开发上。受体介导的内吞可以克服BBTB以实现脑部递药。白介素13 受体α2(IL-13Rα2)是一种在胶质瘤表面高度表达的特异性受体，而Pep-1(CGEMGWVRC) 肽是一种对IL-13Rα2有高度亲和力并能与其特异性结合的线性多肽。因此，将Pep-1锚定于纳米粒表面，通过IL-13Rα2介导的内吞可促进胶质瘤细胞对纳米递药系统的摄取，提高PTX在胶质瘤内的分布，从而增强抗肿瘤效果。

除了利用化疗药直接杀伤浸润胶质瘤外，胶质瘤免疫治疗受到越来越多的关注。由于调节性T细胞(Regulatory cell,Treg)以及骨髓来源性抑制细胞(Myeloid-derivedsuppressor cells,MDSCs)等免疫抑制性细胞浸润，导致胶质瘤微环境为高度免疫抑制状态，使胶质瘤细胞躲避了机体免疫系统的攻击，促进胶质瘤生长与复发。所以，逆转胶质瘤免疫抑制微环境，是胶质瘤免疫治疗的关键所在。CpG是人工合成的含未甲基化CpG基序的寡核苷酸。作为一种新型免疫佐剂，CpG能够模拟细菌DNA，激活树突状细胞(Dendriticcells, DC)与胶质瘤相关巨噬细胞(Glioma-associated macrophages，GAMs)等抗原提呈细胞 (Antigen-presenting cell，APC)内Toll样受体9(Toll-like receptor 9，TLR-9)，增强APC 的肿瘤抗原递呈能力。此外，CpG也可以通过促进APC细胞分泌细胞因子，激活NK细胞和CD8+T细胞，激活中枢神经系统的固有免疫和获得性免疫。然而，CpG只有在脑内持续刺激才能有效激活胶质瘤免疫反应，而CpG在脑脊液的半衰期只有1小时，所以，目前CpG用于胶质瘤免疫治疗必须通过反复脑室注射或瘤内注射给药，这种给药方式不利于临床转化应用。