[发明专利]一种具有抗血管生成活性的强心苷及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及生物化工用技术领域，具体涉及一种具有抗血管生成活性的强心苷及其制备方法和应用。一种具有抗血管生成活性的强心苷是从毛花洋地黄叶子中提取并分离得到的化合物，该化合物对非小细胞肺癌细胞A549,宫颈癌细胞Hela,乳腺癌细胞MCF‑7具有纳摩尔浓度级的增殖抑制活性；另外该化合物能在鸡胚绒毛尿囊膜模型上显著抑制新血管生成，因此可为开发新型抗肿瘤血管生成药物提供候选药物。

技术领域

本发明涉及生物化工用技术领域，具体涉及一种具有抗血管生成活性的强心苷及其制备方法和应用。

背景技术

肿瘤是严重威胁人类健康和生命的常见疾病，全球癌症发病率和死亡率正在呈迅速上升的趋势，已成为21世纪世界各国人类死亡的首要原因和人寿命延长的最主要的障碍。为了降低肿瘤的发病率和死亡率，各国研究人员都在为之进行不懈努力。尽管人类在肿瘤方面取得了长足的进步，但是肿瘤的治疗仍然是一个有待攻克的难题。

肿瘤的生长依赖于血管生成，肿瘤血管生成在恶性肿瘤的生长、侵袭和转移等过程中发挥了极其重要的作用，也被认为是癌症的主要特征之一。以肿瘤的新生血管为作用靶点，通过切断对肿瘤的营养供应和转移路径，阻止肿瘤的生长、侵袭和转移，是一种重要的靶向治疗方法。肿瘤血管靶向药与传统的抗肿瘤药相比，具有毒性小、不易产生耐药性以及具有防止肿瘤的转移等诸多优点。抑制肿瘤血管生成已成为国际上一个很有潜力的研究热点。

强心苷是自然界中存在的一类能够增强心肌收缩作用的甾体苷类化合物，近些年的研究表明其具有抗癌作用，因此对富含强心苷成分的药用植物毛花洋地黄(Digitalislanata)的进行研究，有望从中获得结构新颖活性优良的化合物。

为此，我们提出一种具有抗血管生成活性的强心苷及其制备方法和应用。

发明内容

本发明的目的在于提出了一种结构新颖的具有抗血管生成活性的强心苷及其制备方法和应用。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种具有抗血管生成活性的强心苷是从毛花洋地黄(Digitalis lanata)叶子中提取并分离得到的化合物digitoxigenin3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-methylglucopyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside；所述化合物的结构式如下

所述一种具有抗血管生成活性的强心苷的制备方法包括以下步骤：

S1、将毛花洋地黄(Digitalis lanata)干燥叶子用甲醇浸泡3次，每次7天，甲醇浸提液减压浓缩得到总浸膏。

S2、将步骤S1所得总浸膏分别用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇进行萃取，其中乙酸乙酯段用大孔树脂进行色谱分离，分离时依次采用乙醇-水从0:100,30:70,50:50,80:20,95:5v/v梯度洗脱，收集梯度为乙醇：水＝80:20的洗脱组分；

S3、将步骤S2所得的洗脱组分再用MCI柱色谱进行分离，分离时依次采用甲醇-水从50:50，60:40,70:30,80:20,90:10,100:0v/v梯度洗脱，收集80:20组分并用硅胶柱色谱进行分离；

S4、将步骤S3所得的组分用凝胶柱色谱进行分离，洗脱液为体积比1:1的二氯甲烷-甲醇溶液，收集TLC板上经喷洒3，5-二硝基苯甲酸试剂并加热后显色为紫红色的组分；

S5、将步骤S4所得的组分采用半制备液相色谱进行纯化，流动相为体积比为23:17的甲醇/水，流速为2mL/min，检测波长为200-400nm，接收保留时间为34min,紫外吸收特征波长为215nm的组分即得到所述化合物。