[发明专利]一种具有抗血管生成活性的强心苷及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种具有抗血管生成活性的强心苷的 制备方法，其中，具有抗血管生成活性的强心苷是从毛花洋地黄叶子中提取并分离得到的化合物digitoxigenin3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→4)-β-D-methylglucopyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranosyl-(1→4)-β-D-digitoxopyranoside，所述化合物的结构式如下：

包括以下步骤：

S1、将毛花洋地黄干燥叶子用甲醇浸泡3次，每次7天，甲醇浸提液减压浓缩得到总浸膏；

S2、将步骤S1所得总浸膏分别用石油醚，乙酸乙酯，正丁醇进行萃取，其中乙酸乙酯段用大孔树脂进行色谱分离，分离时依次采用乙醇-水从0:100,30:70,50:50,80:20,95:5v/v梯度洗脱，收集梯度为乙醇：水＝80:20的洗脱组分；

S3、将步骤S2所得的洗脱组分再用MCI柱色谱进行分离，分离时依次采用甲醇-水从50:50，60:40,70:30,80:20,90:10,100:0v/v梯度洗脱，收集80:20组分并用硅胶柱色谱进行分离；以流动相为二氯甲烷/甲醇的混合溶剂梯度洗脱，体积比从40:1到1:1，收集梯度为20:1至10:1的二氯甲烷/甲醇洗脱组分，以二氯甲烷：甲醇＝8:1为展开剂进行薄层色谱分析，该组分R_f值为0.5-0.8，紫外波长254nm下有吸收，TLC板上喷洒3，5-二硝基苯甲酸试剂并加热，显色为紫红色；

S4、将步骤S3所得的组分用凝胶柱色谱进行分离，洗脱液为体积比1:1的二氯甲烷-甲醇溶液，收集TLC板上经喷洒3，5-二硝基苯甲酸试剂并加热后显色为紫红色的组分；

S5、将步骤S4所得的组分采用半制备液相色谱进行纯化，流动相为体积比为23:17的甲醇/水，流速为2mL/min，检测波长为200-400nm，接收保留时间为34min,紫外吸收特征波长为215nm的组分即得到所述化合物。

2.根据权利要求1所述的一种具有抗血管生成活性的强心苷制备方法，其特征在于：所述步骤S5中分离过程时半制备液相色谱的液相色谱仪为Waters1525，流动相为甲醇-水，流速为2mL/min，检测器为Waters 2998光电二极管阵列检测器，色谱柱为Waters SunfireC18半制备柱，规格为10×150mm。