[发明专利]瓦伦西亚烯氧化酶突变体及其在制备圆柚酮中的应用

权利要求书

1.瓦伦西亚烯氧化酶HPO突变体，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示，其中，SEQ ID No.3中至少一个标注为“X”的位点与SEQ ID No.1的相应位点的氨基酸残基突变；SEQ ID No.3的第302位、第484位的氨基酸为同义突变；具体是SEQ ID No.3的第302位氨基酸密码子由SEQ ID No.2中的GGC突变为GGG，SEQ ID No.3的第484位氨基酸密码子由SEQ ID No.2中的GCT突变为GCG。

2.根据权利要求1所述的瓦伦西亚烯氧化酶HPO突变体，其特征在于：

所述突变体具有选择以下的一个位点或多个位点组合突变：302G、365A、480A、480T、480G、482A、482C、484A；其中，302G、484A为同义突变。

3.根据权利要求2所述的瓦伦西亚烯氧化酶HPO突变体，其特征在于：该HPO突变体为HPO_G302G-V480A-V482A-A484A，其氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。

4.编码权利要求1～3任一项所述的瓦伦西亚烯氧化酶HPO突变体的基因。

5.根据权利要求4所述的基因，其特征在于：所述的突变体HPO_G302G-V480A-V482A-A484A的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。

6.含有权利要求4或5所述基因的重组表达载体。

7.含有权利要求4或5所述基因的重组表达细胞。

8.根据权利要求7所述的重组表达细胞，其特征在于：

所述重组表达细胞的宿主菌为酿酒酵母、毕赤酵母、解耶氏酵母或大肠杆菌。

9.根据权利要求8所述的重组表达细胞，其特征在于：

所述酿酒酵母为酿酒酵母CEN.PK2-1Ca菌株。

10.权利要求1～3任一项所述的瓦伦西亚烯氧化酶HPO突变体、权利要求4～5任一项所述基因、权利要求6所述重组表达载体或权利要求7～9任一项所述的重组表达细胞在生物合成圆柚醇或圆柚酮中的应用。