[发明专利]一种用于表达抗体IgG1的rAAV载体及其应用有效
| 申请号： | 202111310452.6 | 申请日： | 2021-11-05 |
| 公开（公告）号： | CN114107390B | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | 吴阳;徐富强;王杰;王起恬;金鼎瑜 | 申请（专利权）人： | 中国科学院精密测量科学与技术创新研究院 |
| 主分类号： | C12N15/864 | 分类号： | C12N15/864;C07K16/32;C07K16/28;C07K16/40;C07K16/06 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所(普通合伙) 42001 | 代理人： | 江丽丽 |
| 地址： | 430071 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 表达 抗体 igg1 raav 载体 及其 应用 | ||
1.一种用于表达抗体IgG1的rAAV载体，其特征在于，所述rAAV载体ITR核心表达元件由广谱强启动子CMV、IgG1重链分泌信号肽序列、IgG1重链编码区、连接多肽编码序列、IgG1轻链分泌信号肽序列、IgG1轻链编码区和人血清白蛋白多聚腺苷酸序列构成。
2.根据权利要求1所述的rAAV载体，其特征在于，所述的连接多肽编码序列由优化的弗林蛋白酶切割位点序列RRKR与自剪切肽2A组成，序列如SEQ ID NO.4所示。
3.根据权利要求1所述的rAAV载体，其特征在于，所述的IgG1重链分泌信号肽序列如SEQ ID NO.2所示，IgG1轻链分泌信号肽序列如SEQ ID NO.3所示。
4.根据权利要求1所述的rAAV载体，其特征在于，所述的IgG1重链编码区包括重链保守区编码序列和重链可变区编码序列，IgG轻链编码区包括轻链保守区编码序列和轻链可变区编码序列。
5.根据权利要求1所述的rAAV载体，其特征在于，优选2型AAV的ITR序列，其骨架基于pAAV-ITR-MCS质粒。
6.权利要求1至5中任一项所述的rAAV载体在体外培养的细胞水平或动物活体水平表达抗体IgG1中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：
（1）利用三质粒转染HEK293T细胞的方法制备获得抗体IgG1-rAAV病毒；
（2）将抗体IgG1-rAAV病毒感染HEK293T细胞，收集细胞培养上清液即可获得相应的抗体IgG1；或将抗体IgG1-rAAV病毒注射感染小鼠，收集小鼠血清即可获得相应的抗体IgG1。
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