[发明专利]二倍半萜类化合物的制备方法及其在抗临床耐药细菌方面的应用

说明书

本发明涉及一种二倍半萜类化合物的制备方法及其在抗临床耐药细菌方面的应用，属于抗菌活性研究技术领域。本发明二倍半萜类化合物结构式如式（Ⅰ）所示；，式（Ⅰ）；该二倍半萜类化合物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和万古霉素耐药粪肠球菌这2株临床耐药细菌的最小抑菌浓度MIC均为2μg/mL，在临床耐药细菌上具有非常大的应用潜能，易于推广应用。

技术领域

本发明属于抗菌活性研究技术领域，具体涉及一种二倍半萜类化合物quiannulatic acid的制备方法及其在抗临床耐药细菌方面的应用。

背景技术

近年来，随着抗生素类药物在临床上的不合理使用，细菌耐药性问题越来越严峻，甚至催生了“超级细菌”，即具有多重耐药性的细菌，如1961年英国Je vons首次发现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的存在，1992年到200 3年间MRSA在金黄色葡萄球菌中的比重由35.9％增加至64.4％。MRSA不仅对甲氧西林和大多数β-内酰胺类抗生素，对其他抗生素如氯霉素、克林霉素、四环素、氨基糖胺类等药物也有耐药性，根据全国细菌耐药监测网显示MRSA 对大部分抗菌药耐药率在60％以上。此外，耐万古霉素肠球菌(VRE)，自从1 980s首次报道以来，在全球范围很快蔓延，由于其对多种抗生素耐药，VRE已成为治疗肠球菌感染的难题。因此，寻找针对MRSA和VRE治疗药物成为当务之急。

面对越来越多耐药细菌的出现，抗生素研发却从80年代“抗生素黄金时期”后逐渐滞后，这样的局面对人类的健康和安全造成了极大威胁，解决细菌耐药问题刻不容缓，目前也引起了全球的广泛关注。因此，为了能够有效地防治和治疗细菌感染疾病，解决目前抗生素药物严重不足问题，发现和开发新型高效、低毒抗细菌药物已成为当今国际医药研究领域的重点之一。

微生物天然产物具有结构新颖、活性独特等特点，如青霉素、链霉素、红霉素等都是来源于微生物，微生物天然产物长期以来在药物发现和开发中占据着非常重要的地位。1981-2019全世界所批准上市的小分子实体药物数据表明，在过去近40年所批准上市的抗感染药物共401个，其中抗细菌药物有162个，而在162个抗细菌药物中，其中直接或间接源于天然产物的有90个，约占56％，说明天然产物在抗感染治疗，尤其是在抗细菌药物中占有率很高。

植物内生真菌由于其生存环境特殊，在与宿主植物长期复杂的共生关系中协同进化，使其具有独特的代谢体系，不仅可以产生结构新颖、活性多样的次级代谢产物，有些还可以产生与宿主植物相似的生物活性物质。大量研究表明，大多数植物内生真菌次级代谢产物具有显著抗细菌活性，并从中分离得到许多抗细菌活性单体化合物，因此，从植物内生真菌中寻找新型抗细菌药物或先导化合物有非常大的研究空间。

发明内容

本发明的主要目的在于提供一种二倍半萜类化合物quiannulatic acid的制备方法及其在抗临床耐药细菌方面的应用。所述二倍半萜类化合物quiannulati c acid在低浓度的情况下可有效抑制2株临床耐药细菌生长，具有非常大的应用潜能。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

二倍半萜类化合物作为制备抗临床耐药细菌药剂的应用，所述的二倍半萜类化合物结构式如式(Ⅰ)所示；

进一步，优选的是，所述临床耐药细菌为ATCC 43300耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和ATCC 51299万古霉素耐药粪肠球菌。

进一步，优选的是，所述的二倍半萜类化合物的制备方法包括如下步骤：

步骤(1)，将真菌Emericella sp.XL029使用大米固体培养基进行培养，静置培养28-30天，得到发酵产物；

步骤(2)，用甲醇萃取步骤(1)得到的发酵产物，将所得到的萃取液减压浓缩得到粗浸膏；

步骤(3)，将步骤(2)得到的粗浸膏用水溶解后，用乙酸乙酯反萃，取乙酸乙酯相减压浓缩，得到浸膏；