[发明专利]Prelp作为银屑病诊断标志及治疗靶点的应用

说明书

本发明属于生物技术领域，涉及Prelp基因的应用，具体地说，涉及Prelp基因作为银屑病检测标志物及治疗靶点的应用，以及其在制备银屑病诊断及预后评估试剂或试剂盒中的应用。本发明通过生物信息数据处理、体内外实验结果证实首次发现prelp与银屑病发生的相关性，并通过检测银屑病人皮肤和构建的细胞系中的prelp的表达，可以检测银屑病的发生，因此，prelp可作为银屑病发生或发展的特异性的生物标志物。同时，在三种针对IL‑17A的生物制剂治疗银屑病后，prelp的表达明显增加，且prelp抑制IL‑17诱导的角质形成细胞的增殖，证明prelp有望成为辅助IL‑17A抗体治疗银屑病的靶点。本发明提供的标志物及其应用对银屑病的基础研究和临床研究具有重大的临床意义。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及Prelp基因的应用。具体地说，涉及Prelp基因作为银屑病标志物及治疗靶点的应用，以及其在制备银屑病诊断及预后评估试剂或试剂盒中的应用。

背景技术

银屑病是一种常见的由免疫介导的皮肤病，全球发病率约1.9%。银屑病不仅会影响患者的身体健康，而且干扰患者的生活水平，心理健康。银屑病的发生与遗传背景，环境因素和免疫应答异常有关，最终导致角质形成细胞异常的增殖或关节滑膜细胞与软骨细胞的炎症反应。在银屑病的发病机制中，Th细胞被认为是关键的致病因子，其中CD4+T细胞产生IFN-γ，il-2等细胞因子与疾病的严重程度相关。IL-23/Th17轴中，IL-17，IL-22，IL-23，TNF-α等也是影响银屑病的关键分子，其中IL-17是一种中心促炎分子，IL-17激活角质形成细胞表达细胞因子包括IL-6，IL-8等，趋化因子包括CXCL1，CXCL2，CCL20等。IL-17a还能诱导β防御素，S100A家族的抗菌肽表达，从而激活固有免疫系统。IL-17a可以诱导角质形成细胞的增殖，在IL-17a敲除的小鼠中，表皮几乎不增殖。另外血清中IL-17的水平和银屑病严重程度相关。

银屑病的诊断包括皮肤镜，皮肤超声和病理诊断等，K16，ki67，S100A7/8是常见的诊断标志物，然而这些分子仍缺乏特异性，因此有必要探索银屑病其他的诊断标志。银屑病的治疗包括局部用药如糖皮质激素，维A酸类药物等；系统药物如甲氨蝶呤，环孢素，生物制剂等；物理治疗如UVA,UVB等。近年来，生物治疗取得了较大进展，一系列针对特异性靶点的生物制剂和小分子药物被研发出来，显示出了良好的疗效。目前针对银屑病的生物制剂主要是TNF-α抑制剂，IL12/IL23抑制剂和IL-17A抑制剂。由于银屑病具有病程长，易复发的特点，目前的治疗方式仍不能解决上述问题，同时许多治疗方式有较大的副作用，因此探究银屑病其他方面的发病机制，寻找更有效的治疗靶点至关重要。

Prelp(proline/arginine-rich end leucine-rich repeat protein)属于小亮氨酸富集蛋白聚糖家族，以往的研究表明它可以与基底膜上的Ⅰ型胶原和软骨上的Ⅱ型胶原结合，在破骨细胞的形成，呼吸道细菌感染和肝细胞癌中发挥作用。然而其在银屑病中的作用尚缺乏研究，深入探讨其在银屑病中的作用机制或许对银屑病的诊断和治疗至关重要。

发明内容

针对上述问题，本发明的目的在于提供一种新的潜在的银屑病诊断和治疗的靶点-prelp：在三种针对IL-17A的生物制剂治疗银屑病后，prelp的表达明显增加；prelp在银屑病患者的皮损中明显低于非皮损处；prelp抑制IL-17诱导的角质形成细胞的增殖。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案。

本发明提供了Prelp基因的表达水平的检测试剂在制备用于银屑病辅助诊断试剂盒中的应用。

进一步地，所述试剂盒通过逆转录PCR、实时定量PCR检测样本中Prelp基因的表达水平。

优选地，所述试剂盒中含有扩增Prelp基因的特异性引物。

更优选地，扩增Prelp基因的特异性引物序列如SEQID NO.1和SEQ ID NO.2所示。