[发明专利]一种抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体浓缩溶液的制备方法

说明书

本申请公开了一种抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体浓缩溶液的制备方法，包括下述步骤：步骤一：将含有抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体的溶液浓缩得到第一浓缩样品；步骤二：采用缓冲溶液置换所述第一浓缩样品，得到置换浓缩液；步骤三：将所述置换浓缩液和氨基酸保护剂母液混匀得到混合液，将所述混合液进行超滤浓缩后得到第二浓缩样品。本申请所述制备方法能够降低高浓度抗体药液的粘度并提高稳定性，方法简单易行，能够进行放大生产，可以保证样品的高纯度并获得较高的回收率。

技术领域

本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种抗人胸腺基质淋巴细胞生成素 (TSLP)单克隆抗体浓缩溶液的制备方法。

背景技术

治疗用生物制品作为一个快速增长的市场，拥有众多的研发管线，同时为患者带来更多创新疗法，针对一些传统小分子药物较难治疗的自身免疫相关的疾病，生物制剂靶向药物提供了更多的选择。另一方面为了降低生物制剂的临床使用成本，并提高患者的依从性，生物制剂剂型逐渐由冻干剂型向水针剂型转变，给药途径也由静脉给药方式向皮下注射剂型转变。由于单克隆抗体注射液的给药剂量通常在100mg～600mg范围，而皮下注射药液体积一般限制在2ml以下，在所述情况下，必须制备高度浓缩的蛋白制剂，通常蛋白含量可达到100mg/ml或者更大的浓度。

高浓度的单克隆抗体注射液给生产工艺的可制造、工艺放大、及最终的患者施用带来了许多挑战。最主要的一个挑战是超高的粘度，由于单克隆抗体的生物高分子特性，以及蛋白分子间相互作用力(如疏水、电荷作用等) 在高浓度条件时增强，倾向于形成高粘性溶液。在某些极端情况下甚至会形成凝胶状物质，这对超滤膜和超滤设备本身带来不小的挑战，比如最终浓缩时压差的急速上升导致的切向流速减小，浓差极化逐渐失控，直至出现蛋白沉淀将膜堵塞的现象，如此必然会造成回收率降低或工艺失败。另一方面，即使通过改进设备或膜包类型获得最终的高浓度蛋白溶液，也难以将其投入到实际的临床应用中，因为皮下给药时需要使用一次性无菌注射器吸取或者采用预充针的最终包装形式，而过高的粘度将导致装药注射器的滑动性能降低，从而无法手动推注入皮下。超滤浓缩高浓度单克隆抗体药液的另一个难题是在高度浓缩时蛋白样品容易聚集形成可溶性聚体，进一步会聚集形成蛋白沉淀。

因此，针对高浓度的抗人TSLP单克隆抗体皮下注射剂的制备，需要开发一种能够有效降低超滤浓缩液的粘度、减少单克隆抗体聚集并提高其稳定性的浓缩液。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本申请提供了一种抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体的浓缩液，所述浓缩液包含蛋白质浓度为 100-300mg/ml的抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体和氨基酸浓度为10～500mM的氨基酸保护剂，所述的浓缩液能够有效降低超滤浓缩液的粘度、减少抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体聚集并提高其稳定性，可以用于注射剂，尤其是皮下注射剂。

QX008N为自主研发的抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体，胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)作为一种新型细胞因子，通常在肺，皮肤和肠屏障表面的上皮细胞中表达。TSLP驱动下游T2细胞因子的释放，包括IL-4、IL-5和IL-13，导致炎症和哮喘症状。TSLP也能激活参与非T2 驱动炎症的多种类型细胞。QX008N可特异性的与TSLP结合，阻止免疫细胞释放促炎细胞因子，从而预防哮喘恶化、改善哮喘控制。

目前国内外尚未有上市的靶向人(TSLP)单克隆抗体药物，其中安进和阿斯利康合作开发的Tezepelumab进度最快，目前正在进行3期临床研究，其制剂浓度为70mg/ml，给药剂量约为210mg，拟给药方式为静脉或皮下注射。体外药效学研究表明QX008N生物学活性与Tezepelumab相当。从降低生物制剂的临床使用成本、提高患者依从性的角度来看，抗TSLP单克隆抗体药物的优选剂型是皮下注射剂，如将QX008N制备成皮下注射液，则该皮下注射液中的蛋白含量要高达100～150mg/mL。

本申请具体技术方案如下：