[发明专利]一种抗人胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)单克隆抗体浓缩溶液的制备方法

权利要求书

1.一种抗人胸腺基质淋巴细胞生成素TSLP单克隆抗体浓缩溶液的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

步骤一：将含有抗人胸腺基质淋巴细胞生成素TSLP单克隆抗体的溶液浓缩得到第一浓缩样品；

步骤二：采用缓冲溶液置换所述第一浓缩样品，得到置换浓缩液；

步骤三：将所述置换浓缩液和氨基酸保护剂母液混匀得到混合液，将所述混合液进行超滤浓缩后得到第二浓缩样品；

所述抗人胸腺基质淋巴细胞生成素TSLP单克隆抗体包含三个重链互补决定区CDR-H1、CDR-H2以及CDR-H3和三个轻链互补决定区CDR-L1、CDR-L2以及CDR-L3，其中：

CDR-H1的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；

CDR-H2的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；

CDR-H3的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；

CDR-L1的氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示；

CDR-L2的氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示；

CDR-L3的氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示；

在步骤一中，浓缩条件为流速为120-300L/m²·h，跨膜压差TMP为0.6-1.5bar；

在步骤二中，缓冲溶液的使用量为第一浓缩样品重量的6~8倍；

在步骤三中，混合液中的氨基酸浓度为50~200mmol/L，所述第二浓缩样品中的蛋白质浓度为100-200mg/ml；

所述缓冲溶液为组氨酸-盐酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、磷酸盐缓冲液或醋酸钠-醋酸缓冲液；

所述氨基酸保护剂选自盐酸精氨酸、组氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸中的一种或两种以上。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤二中，缓冲溶液的使用量为第一浓缩样品重量的7倍。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在步骤三中，混合液中的氨基酸浓度为150mmol/L~200mmol /L。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述抗人胸腺基质淋巴细胞生成素TSLP单克隆抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中，

所述重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示；

所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO：8所示。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述第一浓缩样品中的蛋白质浓度为20～60mg/ml。

6.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述第一浓缩样品中的蛋白质浓度为30~50mg/ml。

7.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液的浓度为5-50mM。

8.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液的浓度为20mM。

9.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液的pH为5.5~6.5。

10.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液的pH为5.7~6.3。

11.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述缓冲溶液为组氨酸-盐酸缓冲液。

12.根据权利要求1-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述氨基酸保护剂包括盐酸精氨酸和组氨酸，在所述第二浓缩样品中，所述盐酸精氨酸的浓度为100-200mM，所述组氨酸的浓度为10-50mM。