[发明专利]一种冬凤兰无菌播种培养基配方及组织培养方法

权利要求书

1.一种冬凤兰无菌播种培养基配方，其特征在于，包括播种培养基和增殖分化培养基，所述播种培养基配方包含：

KC+6-BA 1.5+NAA 0.6+蔗糖20+椰汁100+活性炭1+琼脂4.7，调节PH值为5.6±1；

成分包含：KC基础培养基，6-BA(6-苄基腺嘌呤)1.5mg/L,NAA(萘乙酸)0.6mg/L，蔗糖20g/L，椰汁100mL/L，活性炭1g/L，琼脂4.7g/L；

所述增殖分化培养基配方，成分包含：

1/2MS基础培养基，NAA(萘乙酸)0.1mg/L，6-BA(6-苄基腺嘌呤)2mg/L,蔗糖20g/L，椰汁100ml/L，琼脂4.5g/L。

2.根据权利要求1所述的一种冬凤兰无菌播种培养基配方，其特征在于，组织培养方法包括以下步骤：

S1、挑选授粉足8个月成熟未开裂的冬凤兰蒴果采摘后，用75％酒精擦拭干净；

S2、擦拭干净的蒴果置于超净工作台接种盘内，先将蒴果用浓度为75％的酒精浸泡30s，再用0.1％的升汞表面消毒15min，无菌水冲洗4次，干净后用无菌滤纸吸干水分待用；

S3、用消毒刀片切掉蒴果两头，纵剖开蒴果，将种子取出置于环保茶袋，再将茶袋整个泡进0.2mol/L NaClO中浸泡15min进行预处理；

S4、将预处理过的种子用无菌水冲洗两遍，将装种子的茶袋用消毒镊子撕开，用刀片轻轻从茶袋上刮下种子置于播种培养基表面，滴加1-2滴无菌水摇匀，让种子均匀播种在所述播种培养基表面；

种子播种后置于暗培养，直至开始萌发；

S5、待种子萌出原球茎，将原球茎接种到增殖分化培养基进行增殖，待增殖到一定数量，便可进行根芽分化培养。

3.根据权利要求2所述的一种冬凤兰无菌播种培养基配方及组织培养方法，其特征在于，培养室温度26±2℃，萌出后光照1500-2000lx，每日光照12小时。

4.根据权利要求2所述的一种冬凤兰无菌播种培养基配方及组织培养方法，其特征在于，步骤S3中环保茶袋的规格为4×6厘米。

5.根据权利要求2所述的一种冬凤兰无菌播种培养基配方及组织培养方法，其特征在于，步骤S4中暗培养方法为：将所述播种培养基放培养架上，用遮光率99％的黑色无帆布遮盖，待开始萌发后再揭开黑布。