[发明专利]一种基因/小分子化合物纳米递药系统及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种基因/小分子化合物纳米递药系统，其特征在于，所述递药系统包括DNA纳米花载体、芦丁、miR-124嵌合体和DNA-靶向配体；所述芦丁与DNA纳米花载体通过π-π堆叠实现负载，miR-124嵌合体、DNA-靶向配体与DNA纳米花载体通过DNA分子杂交反应负载；

所述DNA纳米花载体由以序列如SEQ ID NO:1为模板通过RCA反应制备获得；

所述miR-124嵌合体通过miR-124反应链和miR-124长链互补链退火杂交反应获得；

所述DNA-靶向配体由以序列如SEQ ID NO:2为模板链，经MAL修饰后与侧链含有巯基的靶向配体进行加成反应获得；

所述靶向配体为能够穿透血脑屏障的配体，具体为：

嗜神经性病毒衍生肽、脑靶向核酸适配体、Angiopep2、细胞穿膜肽、D肽或T7肽中的任意一种；

所述DNA纳米花载体、芦丁、miR-124嵌合体的摩尔浓度比为1：480：14；所述DNA纳米花载体的浓度为0.1 μM～3 μM, 所述芦丁的浓度为48 μM～1440 μM, 所述miR-124嵌合体的浓度为1.4 μM～28 μM；

所述靶向配体的浓度为0.1 mg/mL～0.9 mg/mL。

2.一种权利要求1所述的基因/小分子化合物纳米递药系统的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1:将miR-124反应链和miR-124长链互补链于缓冲溶液中混合、退火、杂交获得miR-124嵌合体；

S2：将序列如SEQ ID NO:2且5’修饰马来酰亚胺基团的DNA链和靶向配体溶液混合，孵育后获得DNA-靶向配体；

S3:将序列如SEQ ID NO:1的DNA模板链、引物和反应缓冲液混合、涡旋退火后，加入T4DNA连接酶连接获得环状DNA，将BSA、dNTPs、DNA聚合酶和缓冲液在冰浴条件下滴入至所述环状DNA中，进行RCA反应得到DNA纳米花；

S4:将芦丁配制成溶液并滴入所述DNA纳米花，室温孵育过夜获得Rutin@DFs；

S5:将Rutin@DFs、miR-124嵌合体和DNA-靶向配体混合，孵育后获得基因/小分子化合物纳米递药系统。

3.根据权利要求2所述的基因/小分子化合物纳米递药系统的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中miR-124反应链和miR-124长链互补链的序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。

4.根据权利要求2所述的基因/小分子化合物纳米递药系统的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中引物的脱氧核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示。

5.一种权利要求1所述的基因/小分子化合物纳米递药系统或权利要求2-4任一制备方法获得的基因/小分子化合物纳米递药系统在制备治疗神经退行性疾病药物中的应用。

6.一种权利要求1所述的基因/小分子化合物纳米递药系统或权利要求2-4任一制备方法获得的基因/小分子化合物纳米递药系统在制备阿尔茨海默病靶向治疗药物中的应用。

7.一种治疗阿尔茨海默病靶向药物，其特征在于，所述药物为包含权利要求1所述的基因/小分子化合物纳米递药系统或权利要求2-4任一制备方法获得的基因/小分子化合物纳米递药系统的外用制剂、口服制剂或注射制剂。