[发明专利]一种类固醇激素的检测方法

说明书

本发明公开了一种类固醇激素的检测方法；属于分析技术领域；其步骤包括样品前处理步骤、液质检测步骤；样品前处理步骤包括超声提取和固相萃取；超声提取所用溶剂包括甲醇、乙二醇衍生物和乙酸乙酯；乙二醇衍生物由环氧乙烷与原莪述烯醇制得。该检测方法精密度与准确度较高，可以实现类固醇激素中雌激素、雄激素和皮质醇激素的同时提取及准确定量。

技术领域

本发明属于分析技术领域，具体涉及一种类固醇激素的检测方法。

背景技术

类固醇激素是一类由胆固醇合成代谢具有生物活性的化合物。根据其生物学功能可以分为性激素和肾上腺皮质激素。性激素主要包括雌激素、雄激素和孕激素，肾上腺皮质激素包括糖皮质激素和盐皮质激素。许多类固醇激素药物已经广泛用于人类和动物的治疗。环境中的类固醇激素主要来自于人和动物的排泄物如尿液和粪便以及人工合成的类固醇激素的使用和排放。经过人和动物排泄过程，类固醇激素会通过污水处理厂出水口或者人为直接排放进入到环境中。类固醇激素是一类典型的内分泌干扰物，在环境中普遍存在，是继臭氧层破坏和全球气候变暖之后的第三大环境问题。

类固醇激素在极低的剂量即可引起极强的内分泌干扰效应，这类物质一旦进入环境，就会对生物体以及人类产生极大的危害。它作为环境激素的重要成员一直以来都是学术界研究的热点。目前，国内外主要研究了这类物质在污水处理厂、地下水、河流、湖泊、土壤中的存在状况，并进行大量的学术研究。但对于海域中海水、海洋沉积物、生物体中类固醇激素的存在状况鲜有研究及报道。因此，研究和开发一种类固醇激素分析检测方法，将为海域中类固醇激素环境管理与风险防控提供科学依据，并对海域类固醇激素污染现状及处理的研究具有一定的参考价值。

发明内容

本发明的目的在于提供一种精密度与准确度较高，可以实现类固醇激素中雌激素、雄激素和皮质醇激素的同时提取及准确定量的检测方法。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种类固醇激素的检测方法，包括样品前处理步骤、液质检测步骤；

样品前处理步骤包括超声提取和固相萃取；

超声提取所用溶剂包括甲醇、乙二醇衍生物和乙酸乙酯；

乙二醇衍生物由环氧乙烷与原莪述烯醇制得。

本发明采用环氧乙烷与原莪述烯醇制得乙二醇衍生物，将乙二醇衍生物作为提取溶剂的成分，并采用溶剂中特定的比例进行超声提取-固相萃取净化-液质检测方法检测，其精密度与准确度较高，可以实现类固醇激素中雌激素、雄激素和皮质醇激素的同时提取及准确定量；进而监测和评估水产品养殖区水环境、沉积物环境以及生物体的环境激素污染风险。可能是由于乙二醇衍生物含有的活性基团能够与类固醇激素等成分结合，因而能有效从海域中海水、海洋沉积物、生物体中提取出来，以准确测量不同环境介质中类固醇激素的含量。

可选地，在本发明的一些实施例中，样品为海水、海洋沉积物、污水或污泥中的一种。

可选地，在本发明的一些实施例中，样品前处理步骤为：在溶剂中加入样品，然后进行超声提取，得到有机提取液，减压旋蒸，得到有机浓缩液；

将浓缩液进行固相萃取，得到洗脱液，再进行氮吹，过滤，定容，得到处理后的样品。

可选地，在本发明的一些实施例中，甲醇、乙二醇衍生物、乙酸乙酯的体积比为1:0.5～1:1。

进一步可选地，在本发明的一些实施例中，固相萃取步骤为：安装固相萃取柱，依次用甲醇和超纯水活化固相萃取柱，抽真空，使浓缩液溶于溶剂过柱，淋洗固相萃取柱，氮吹吹干，然后依次用乙酸乙酯、乙腈、超纯水洗脱液洗脱固相萃取柱，得到洗脱液。

进一步可选地，在本发明的一些实施例中，淋洗用淋洗液为超纯水，以避免化合物的流失，得到回收率较高的产物。